デレーションミュータントの作製に
製品説明
本製品はM13系またはpUC系ベクターなどに組み込まれたDNA断片を末端から分解し、種々の大きさの断片を含むクローンを得るためのキットである。これにより、長鎖のDNAシーケンシングを行うことができ、また目的の領域だけを含むクローンの調製等にも適している。本キットはHenikoffの方法およびYanisch-Perronらの方法を改良したものである。
内容
（5回分）
* Ligation Solution A, B は、DNA Ligation Kit Ver.1（製品コード 6021）に含まれる試薬と同じものである。
| Exonuclease III（180 U/μl） | 10 μl |
| Exo III Buffer | 500 μl |
| Mung Bean Nuclease（25 U/μl） | 20 μl |
| MB Nuclease Buffer | 500 μl |
| Klenow Fragment（2 U/μl） | 10 μl |
| Klenow Buffer | 250 μl |
| Ligation Solution A * | 500 μl |
| Ligation Solution B * | 60 μl |
* Ligation Solution A, B は、DNA Ligation Kit Ver.1（製品コード 6021）に含まれる試薬と同じものである。
保存
－20℃
長鎖DNAのシーケンシングの原理
本製品は、Exonuclease IIIの3’-recessed endまたはblunt endからの二本鎖特異的な3’→ 5’exonuclease活性を利用したDNAの一本鎖化と、Mung Bean Nucleaseによる一本鎖DNAの分解とを組み合わせてM13、pUC系ベクターなどに組み込まれたDNA断片を末端より分解し、種々の大きさの断片を含むクローンを効率良く得るためのキットである。このキットにより、長鎖のDNAシーケンシングに必要な一連のデリーションミュータントを作製できる他、目的の領域だけを含むクローンの調製等にも利用できる。
図1 M13 mp18 BamH I siteにクローニングされたDNA断片をデリーションさせる場合
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