- わずか1時間でナノグラム量のRNAから1stストランドcDNAを効率的に合成
- 一つのRNAソースから多種類の遺伝子を同時に解析可能
- RNaseインヒビターの使用により完全長cDNAを合成
製品説明
Advantage RT-for-PCR Kitはtotal RNAやpoly A+ RNAから1st strand cDNAを合成するためのキットである。本キットを用いることで、ナノグラム量のRNAからPCRに十分な量のcDNAを得ることができる（1）。各キットには、oligo(dT)18プライマー、ランダムヘキサマー、PCR用コントロールプライマー、コントロールRNAなど、cDNA合成に必要な試薬がすべて含まれている。（注：PCRに必要な試薬は含まれていないので、別途準備が必要。Clontechでは、Advantage cDNA Polymerase Mix、Titanium Taq DNA Polymerase、Advantage 2 Polymeraseなどの使用を推奨している。）
図1. Advantage RT-for-PCR Kitを用いて合成したcDNAの信頼性
マウスマクロファージ細胞株RAW 264.7にリポポリサッカライド刺激を行い、iNOS mRNA誘導のタイムコースを検討した。図に示した時点（hr）で培養細胞からRNAを抽出し、約0.4 μgを用いてAdvantage RT-for-PCR Kitで逆転写を行った。さらに、得られたcDNAの5％を鋳型としてPCR増幅を行った。増幅には、（パネルA）Mouse G3PDH Amplimer Set（製品コード 639009）；コントロール用、（パネルB）Mouse iNOSプライマーを用いた。得られたPCR産物の20％をサンプルとして、1.8％ EtBr／アガロースゲルで電気泳動を行った。レーンM：φX174/Hae III DNA サイズマーカー
内容
・Oligo(dT)18 Primer
・Random Hexamer Primers
・dNTP Mixture
・Reaction Buffer
・Recombinant RNase Inhibitor
・DEPC-Treated H2O
・MMLV Reverse Transcriptase
・Control RNA (mouse liver total RNA)
・Premixed Mouse G3PDH Amplimers
・Random Hexamer Primers
・dNTP Mixture
・Reaction Buffer
・Recombinant RNase Inhibitor
・DEPC-Treated H2O
・MMLV Reverse Transcriptase
・Control RNA (mouse liver total RNA)
・Premixed Mouse G3PDH Amplimers
保存
Control RNA (mouse liver total RNA)：－70℃
その他のコンポーネント：－20℃
その他のコンポーネント：－20℃
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