Pluripotency Check Kit（マウスiPS細胞分化多能性チェックキット）

幹細胞やiPS細胞が分化多能性を保持しているかどうかを知ることは、幹細胞／iPS細胞研究において非常に重要なステップである。指標遺伝子検出用の評価済みのプライマーのセット(1)、あるいはこのPrimer Setに加え、必要な試薬も含むキットを用いることで、細胞の分化多能性の有無をRT-PCRで迅速に調べることができる。

Pluripotency Check PCR Kitは、幹細胞やiPS細胞の分化多能性の有無をRT-PCRで確認するために必要な試薬（RNA抽出、RT-PCR）やプライマーをすべて含んでいる。16種類のForwardおよびReverse Primerのセットにより、多能性幹細胞に特異的に発現している9種類の遺伝子と2種類のコントロール用遺伝子を検出できる（1；表1）。増幅サイズの異なるプライマーを用いることで、内在性の遺伝子発現と導入した遺伝子の発現を容易に区別でき、キット中のいくつかの遺伝子のプライマーまたは全プライマーを使用して分化多能性を調べることができる。

Pluripotency Check PCR Primer Setは別売りのプライマーセットであり、PCR用試薬などを含まない。

表1. 分化多能性チェック用 PCRプライマーセット

Primer Set	増幅サイズ	Primer Set	増幅サイズ
Oct3/4（Total）1	485 bp	Klf4（Total）1	739 bp
Oct3/4（Endogenous）1	224 bp	Klf4（Endogenous）	206 bp
Nanog（Total）1	364 bp	Ecat11	164 bp
Nanog（Endogenous）1	223 bp	ERas1	210 bp
Sox2（Total）1	193 bp	Esg11	376 bp
Sox2（Endogenous）1	297 bp	Rex11	287 bp
c-Myc（Total）1	228 bp	ß-Actin（Control）	603 bp
c-Myc（Endogenous）1	170 bp	GAPDH（Control）	568 bp

Endogenous：内在性遺伝子
Total：内在性遺伝子＋導入遺伝子

図1. マウスES細胞の分化多能性の確認
Total RNAをマウスES細胞株ES-E14TG2より抽出し、cDNA合成、PCR増幅をおこなった（操作手順はPT5086-2に従う）。
M：100 bp DNAマーカー　レーン1：Oct3/4（Total）　レーン2：Oct3/4（Endogenous）　レーン3：Nanog（Total）　レーン4：Nanog（Endogenous）　レーン5：c-Myc（Total）　レーン6：c-Myc（Endogenous）　レーン7：Sox2（Total）　レーン8：Sox2（Endogenous）　レーン9：Klf4（Total）　レーン10：Ecat1　レーン11：ERas　レーン12：Esg1　レーン13：Rex1　レーン14：GAPDH (control)　レーン15：β-Actin (control)
Klf4（Endogenous）, data not shown.

Pluripotency Check PCR Kit
（製品コード 631965 ）
・Pluripotency Check PCR Primer Set（25回×16）（製品コード 631966）
・NucleoSpin RNA II（10反応分）
・SMART MMLV Reverse Transcriptase（8,000 units）（製品コード 639523）
・Titanium Taq PCR Kit（30回）（製品コード 639211）

NucleoSpin RNA II Kit：室温
その他の試薬：－20℃

幹細胞・再生医療研究ガイド
タカラバイオで展開している幹細胞研究のための試薬・受託サービス選択ガイドの他、関連情報をまとめています。