small RNAとlarge RNAの同時調製
- 動植物組織、培養細胞からsmall RNA（miRNAなど）を含むtotal RNAを精製
- smallRNAとlargeRNAを分画して精製するoption protocolあり
- 同時にSDS-PAGEなどに使用可能なタンパク質も調製可能*
- 有機溶剤を使用しないスピンカラムタイプ
- NucleoSpin Filters、NucleoSpin Protein Removal Columns、rDNaseなどをセット
* タンパク質定量には、Protein Quantification Assay（740967.50）をご利用ください。
NucleoSpin miRNAはRNA精製用のカラムとして2種類（NucleoSpin RNA Column、NucleoSpin miRNA Column）が同梱されていましたが、Lot. 1708/001以降ではNucleoSpin RNA Column（青色リング）にまとめられました。しかし、NucleoSpin RNA ColumnをNucleoSpin miRNA Columnの代わりに使用することができますので、従来品と同様にご使用いただけます。
また、製品説明書はsmall RNAとlarge RNAを同時に精製するプロトコールのみが記載されています。従来のsmall RNAとlarge RNAを分画して精製するプロトコールは下記のSupplementary protocolをご覧ください。
Supplementary protocol
製品説明
NucleoSpin miRNAは様々なサンプルからsmall RNA（＜200 bases 例：miRNA、pre-miRNA、tRNA、5S RNA）、large RNA（＞200 bases 例：mRNA、18S rRNA、28S rRNA、pri-miRNAなど）を合わせて精製するキットである。またその過程でタンパク質を分離精製する事もできる。
さらにoption protocolでsmall RNAとlarge RNAを分画精製することも可能である。
この場合はカラムを2個使用するため精製回数が半分になるが、NucleoSpin miRNA column/Buffer setを購入することで必要なカラムとBufferを追加することができる。
さらにoption protocolでsmall RNAとlarge RNAを分画精製することも可能である。
この場合はカラムを2個使用するため精製回数が半分になるが、NucleoSpin miRNA column/Buffer setを購入することで必要なカラムとBufferを追加することができる。
| 原理 | シリカメンブレン法 |
| 形状 | ミニスピンカラム |
| サンプル量 | ～107個 培養細胞、～30 mg 動物組織 ～50 mg 植物組織、～150 μl 反応液 |
| 精製サイズ | ≧18 nt |
| 回収量 | 10 μg small RNA、95 μg large RNA（HeLa細胞 107個） |
| 溶出液量 | 30～100 μl |
| 精製時間 | 動物組織からsmall RNAとlarge RNAを調製＜45分 |
| 結合容量 | 200 μg |
内容
NucleoSPin miRNA
NucleoSPin miRNA Column/Buffer Set
・NucleoSpin RNA Column
・Wash Buffer MW1
・Wash Buffer MW2
 | ・Lysis Buffer ML |
| ・Protein Precipitation Buffer MP | |
| ・Binding Buffer MX | |
| ・Membrane Desalting Buffer MDB | |
| ・Reaction Buffer for rDNase | |
| ・rDNase, RNase-free（凍結乾燥品） | |
| ・Wash Buffer MW1 | |
| ・Wash Buffer MW2 | |
| ・RNase-free H2O | |
| ・NucleoSpin Filters | |
| ・NucleoSpin RNA Columns | |
| ・NucleoSpin Protein Removal Columns | |
| ・Collection Tube（1.5 ml） | |
| ・Collection Tube（2 ml） | |
| ・Collection Tube（2 mlフタ付き） |
・NucleoSpin RNA Column
・Wash Buffer MW1
・Wash Buffer MW2
キット以外に必要な試薬
・96～100％エタノール
・酸性フェノール／クロロホルム（pH4.5～4.7）：植物組織からのRNA抽出（オプション）
・NucleoZOL、RNAiso PlusなどのRNA抽出試薬（オプション）
・酸性フェノール／クロロホルム（pH4.5～4.7）：植物組織からのRNA抽出（オプション）
・NucleoZOL、RNAiso PlusなどのRNA抽出試薬（オプション）
保存
rDNase, RNase-free（凍結乾燥品）：4℃
その他：室温
その他：室温
操作手順
用途
- 動物組織、培養細胞などからsmall RNA、large RNAを並行して精製
- 植物組織などからsmall RNA、large RNAを並行して精製
- DICER反応液などからsiRNAとlarge RNAを精製
NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。
- 注意事項
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