特定菌用EMA試薬：腸管出血性大腸菌用（EMA-PCR法）
【重要なお知らせ】
弊社リアルタイムPCR装置「Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ」において弊社遺伝子検査キットを使用する場合の解析条件を変更いたしました。
変更の詳細はこちら
取扱説明書およびその他製品に付随する文書は、順次更新予定です。
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製品説明
Viable enterohemorrhagic E. coli Selection Kit for PCR（製品コード 7712）は、腸管出血性大腸菌用に至適化したEMA処理用キットで、腸管出血性大腸菌の死菌由来DNAを効率よく修飾する。本製品で検体のEMA処理を行った後、DNAを抽出してサンプルとすることで、CycleavePCR O-157(VT gene) Screening Kit Ver.2.0（製品コード CY217A/B）を用いたリアルタイムPCRにより、腸管出血性大腸菌の生菌由来DNAを、死菌由来DNAの影響を除いて検出することができる。
【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection)（製品コード CY290）と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することができる。
【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection)（製品コード CY290）と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することができる。
内容
（50 検体分）
Solution A-EHEC：
腸管出血性大腸菌用に至適化した核酸修飾反応促進試薬である。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含む。
Solution B-EHEC：
腸管出血性大腸菌用に至適化した選択的膜透過性色素（EMA）を含む溶液
| 1． | Solution A-EHEC | 250 μl×2 |
| 2． | Solution B-EHEC* | 200 μl×4 |
| ＊ | Solution B-EHECは光による化学反応により物質性状が変化し、核酸修飾能力が減衰するので、遮光に留意して保管してください。長時間操作される場合はアルミホイルなどで遮光してください。 |
Solution A-EHEC：
腸管出血性大腸菌用に至適化した核酸修飾反応促進試薬である。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含む。
Solution B-EHEC：
腸管出血性大腸菌用に至適化した選択的膜透過性色素（EMA）を含む溶液
保存
－20℃
キット以外に必要な機器、試薬（主なもの）
1.5 mlマイクロチューブ
卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
ボルテックスミキサー
【前処理操作（EMAによる死菌由来DNAの修飾）】卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
ボルテックスミキサー
光照射装置 LED Crosslinker 30（製品コード EM300)、光照射装置LED Crosslinker 12（製品コード EM200)*1、*2、またはLED Crosslinker*1、*2
ヒートブロック（95℃で使用可能なもの）
1.5 mlマイクロチューブ*3
【DNA抽出】ヒートブロック（95℃で使用可能なもの）
1.5 mlマイクロチューブ*3
NucleoSpin Tissue XS（製品コード 740901.10/.50/.250）*4
特級エタノール（＞99％）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
【リアルタイムPCR】特級エタノール（＞99％）
ヒートブロック（56℃および70℃で使用可能なもの）
CycleavePCR O-157(VT gene) Screening Kit Ver.2.0（製品コード CY217A/B）
リアルタイムPCR用装置および専用チューブ
・Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960）*2
・Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760）*2
解析には食品環境検査用ソフトウェア、またはThermal Cycler Dice Real Time System Softwareを用いる。
・Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
リアルタイムPCR用装置および専用チューブ
・Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960）*2
・Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760）*2
解析には食品環境検査用ソフトウェア、またはThermal Cycler Dice Real Time System Softwareを用いる。
・Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）など
*1 ハロゲンランプ［岩崎電気株式会社、写真証明用アイランプ スポット（集光形）、PRS500W］で代用できる。
*2 本製品の販売は終了しました。
*3 透明チューブの使用を推奨。弊社では下記のチューブで実績がある。
［1.5 mlチューブ(スクリューキャップ）］
1.5 mlループ付凍結保存チューブ（SARSTEDT：Code. 72.692.100）
［1.5 mlチューブ］
DNA LoBindチューブ, 1.5 ml PCR clean（Eppendorf：Code. 0030108051）
*4 使用検体に着色や濁りがあるなど夾雑物の混入が疑われる場合はNucleoSpin Soil（製品コード 740780.10/.50/.250）の使用を推奨する。
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- 注意事項
- 本製品は食品分析および環境分析用試薬です。ヒト、動物への医療、臨床診断には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。検査結果判定により発生する問題に関してタカラバイオ株式会社は一切の責任を負いません。
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