NucleoSpin^® DNA Insect

NucleoSpin DNA Insectは、新鮮／凍結／乾燥／エタノール保存された昆虫や甲殻類からゲノムDNAを高純度に精製するキットである。精製DNAはシーケンスや他用途に使用可能である。
本キットでは、キットに含まれるMN Bead Tubes Type D（steel beadを含む）をMN Bead Tube Holderやswing millなどの一般的破砕装置で使用してサンプルを破砕した後、スピンカラムを使用してゲノムDNAを精製する。

MN Bead Tubes Type E（別売）はsteel beadとglass beadが1つのチューブに入っている。昆虫検体中のバクテリアなどのDNAを精製する場合にはこちらのMN Bead Tubes Type Eの使用を推奨する。

原理	シリカメンブレン法
形状	ミニスピンカラム
サンプル量	＜40 mg 新鮮、凍結、乾燥、エタノール保存の昆虫／甲殻類
精製サイズ	200 bp～約50 kb
DNA回収量	＜25 μg（サンプルに依存）
A260/280	1.7～1.9
溶出液量	25 ～200 μl
精製時間	35分
結合容量	60 μg

（注）本製品の使用には撹拌式細胞破砕装置、もしくはMN Bead Tube Holderと対応するvortex mixerが必要です。

・Lysis Buffer MG
・Wash Buffer BW
・Wash Buffer B5 (Concentrate)
・Elution Buffer BE^＊
・Liquid Proteinase K
・MN Bead Tubes Type D
・NucleoSpin DNA Insect Columns
・Collection Tubes (2 ml)

＊：組成：5 mM Tris-HCl, pH8.5

室温

試薬
・96～100％エタノール

器具
・1.5 mlマイクロ遠心チューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・微量高速遠心機
・推奨細胞破砕装置：
　　Vortex-Genie 2 (サイエンティフィックインダストリーズ社)＋MN Bead Tube Holder（製品コード 740469）
　　撹拌式細胞破砕装置（Retsch社 MM200など）


MN Bead Tube Holder（製品コード 740469）
この製品の使用方法はこちらをご覧ください。

1．ショウジョウバエ 2．ボウフラ（蚊幼虫） 3．コオロギ 4．イエコオロギ 5．ミールワーム

図．少量サンプルからのゲノムDNA精製
本製品と他社2製品を使用し、各キットのプロトコールに従って昆虫類からゲノムDNAを精製した。

• 1個体または10個体のショウジョウバエから精製されたDNAの回収量をqPCR法により測定した。本製品を使用することで、少量サンプルからも効率よくDNA精製が可能であった。
• 1個体のショウジョウバエから精製されたDNAのアガロース電気泳動を行い、その品質を比較した。
  本製品で精製されたDNAは分解されておらず、RNAの混入も少ない高純度のDNAだった。
• さまざまな種類の昆虫からゲノムDNAを精製した。精製DNAの純度を示すため、A_260/280比を示す。これらの昆虫から本製品により精製されたDNAはすべて、A_260/280の値が1.8に近く、夾雑物の少ない高純度なDNAだった。
• 上記で精製したDNAのアガロース電気泳動を行った。本製品で精製されたDNAはすべて分子量が大きく、RNAの混入も少ないことが分かった。