製品説明
NucleoMag RNA ProはNucleoMag RNAの改良版であり、培養細胞、動物組織に加えて、植物組織などからのRNAのハイスループット精製にも対応したキットです。
さらに、NucleoMag RNA/DNA Proは、1つの試料からDNAとRNAの同時精製が可能で、DNAとRNAを別々のチューブに回収できます。
これらの製品は手動、自動化装置のいずれの精製方法にも柔軟に対応し、磁気ビーズによる効率の良い核酸精製を高い再現性で実現することができます。
抽出したRNA、DNAはqPCR、RT-PCR、NGS解析などに使用できます。なお、植物組織からの精製の場合は、別売りの、Lysis Buffer RL1が必要です。
| NucleoMag RNA Pro | NucleoMag RNA/DNA Pro |
原理 | 磁性ビーズ法 |
操作 | 手動または自動化装置 |
サンプル量 | 組織<20 mg 細胞<2×106個 植物(葉)<40 mg |
精製核酸 | RNA | RNA・DNA |
標準的RIN* | 7~10 |
A260/280 | 1.8~2.0 |
A260/230 | 2.0~2.3 |
溶出液量 | 50~200 μl |
結合容量 | 0.4 μg/μl beads |
精製時間 | 約90~120分/プレート | 約120分/プレート |
*RNA integrity number
A
B
図1.精製RNAの収量と純度
NucleoMag RNA Proを用いて培養細胞(HeLa 2×10
6 cells)、動物組織(シカ肺、腎臓 各20 mg)、植物の葉(小麦、トウモロコシ、タバコ 各40 mg)など様々なサンプルからRNAを精製した。精製RNAの収量(A)と純度(B)を測定した。すべてのサンプルから、高い収量で高品質のRNAが精製されていることが確認された。
図2.少量の試料からも効率的にRNAを精製
シカ腎臓、小麦の葉についてそれぞれ1.25~20 mgの試料からNucleoMag RNA Proを用いてRNAを精製し、その一部を鋳型としてRT-qPCRを実施した。どちらのサンプルにおいても、インプットした鋳型量とCT値の間には強い相関性があり、R
2値はシカ腎臓で0.9952、小麦で0.9921であった。少量の試料からでも安定したRNA精製が可能であることが示された。
表1.RNAとDNAを同時調製
HeLa細胞(2×10
6 cells)、シカ腎臓(20 mg)、小麦の葉(40 mg)からNucleoMag RNA/DNA Proを用いて、RNAとDNAを同時に精製した(各3回試行)。精製RNAおよびDNAの収量、純度とRNAのRIN値の測定結果から、RNA、DNAともに高品質で再現性の高い精製結果が得られることが確認できた。
表2.他社製品との比較
HeLa細胞(1×10
6 cells)、シカ肺または腎臓(各1.7 mg)、小麦またはトウモロコシの葉(各5 mg)からNucleoMag RNA/DNA Proと他社製品(Supplier Z)を用いてそれぞれ推奨プロトコールに従ってRNAとDNAを同時精製した。精製RNAおよびDNAの収量、純度とRNAのRIN値の測定結果から、NucleoMag RNA/DNA Proは他社製品よりも高品質、高収量の精製核酸が得られることが確認できた。
<MACHEREY-NAGEL社 取得データ>
内容
NucleoMag RNA Pro
- NucleoMag B-Beads
- Lysis Buffer MRL
- Binding Buffer MRB
- Wash Buffer MRW
- Elution Buffer MRE*
- Reducing Agent TCEP
- rDNase, lyophilized
- Reaction Buffer for rDNase
- RNase-free H2O
*Elution Buffer MRE: RNase-free water
NucleoMag RNA/DNA Pro
上記のNucleoMag RNA Proに下記2種類のBufferが追加されている
- Buffer DNA Wash (Concentrate)
- Buffer DNA Elute
本製品以外に必要な試薬、機器・消耗品(主なもの)
70%エタノール
ピペットチップ
ピペット
オプション:植物サンプルからのRNA回収用Lysis Buffer Buffer RL1(製品コード 740385.125)
オプション:RNA、DNA回収用Bufferセット NucleoSpin RNA/DNA Buffer Set(製品コード 740944)
(手動の場合)
磁気ビーズ分離用Magnetic Stand NucleoMag SEP(製品コード 744900)
磁性ビーズ分離用プレート Square-well Block(製品コード 740481、740481.24)
サンプル溶解チューブ Rack of Tube Strips with Cap Strips(製品コード 740477、740477.24)
精製核酸溶出プレート Elution Plate U-bottom(製品コード 740486.24)
(自動化装置の場合)
磁性ビーズ対応自動化装置:MagnetaPure 32 Plus(製品コード 747010)など
MagnetaPure 32 Plusを使用する場合の消耗品
96-Deep-Well plates for magnetic rod systems(製品コード 744955)
8-place tip combs for magnetic rod systems(製品コード 744960)
操作手順
NucleoMag RNA ProによるRNA回収
保存
常温
用途
qPCR、RT-PCR、RNAシーケンス、NGS解析 など
NucleoMagはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。