TaKaRa DEXPAT™

TaKaRa DEXPATと高感度PCR増幅用TaKaRa Ex Taqとの組合せで、より確実なPCR増幅が可能である。以下にTaKaRa Ex Taqを用いた例を示す。
10年前に作製された大腸癌組織のホルマリン固定パラフィン包埋組織切片(10 μm、2枚)からDEXPATで抽出したDNAを用いてPCRを行った。

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genome DNA(DEXPAT抽出液)	5 μl
10×Ex Taq Buffer	5 μl
dNTP Mixture	5 μl (250 μM each)
Primer #1(20 pmol/μl)	0.5 μl (10 pmol)
Primer #2(20 pmol/μl)	0.5 μl (10 pmol)
TaKaRa Ex Taq	0.25 μl (1.25 U/50 μl)
滅菌精製水	up to 50μl

PCR条件 　↓
72℃、5 min
3％ Agarose gel

Lane M：pHY Marker (100 ng)
Lane 1～3：従来抽出法
Lane 4～6：DEXPAT抽出法

genome DNA(DEXPAT抽出液)	5 μl
10×Ex Taq Buffer	5 μl
dNTP Mixture	5 μl (250 μM each)
Primer #1(20 pmol/μl)	0.5 μl (10 pmol)
Primer #2(20 pmol/μl)	0.5 μl (10 pmol)
TaKaRa Ex Taq	0.25 μl (1.25 U/50 μl)
滅菌精製水	up to 50μl

PCR条件 　↓
72℃、5 min

3％ Agarose gel
Lane M：pHY Marker (100 ng)
Lane 1：従来抽出法
Lane 2：DEXPAT抽出法

genome DNA(DEXPAT抽出液)	5μl
10×Ex Taq Buffer	5μl
dNTP Mixture	5μl (250 μM each)
Primer #1(20 pmol/μl)	0.5μl (10 pmol)
Primer #2(20 pmol/μl)	0.5μl (10 pmol)
TaKaRa Ex Taq	0.25μl (1.25 U/50μl)
滅菌精製水	up to 50μl

PCR条件〈1 st PCR〉 　↓
72℃、5 min

〈2nd PCR〉
Template　：1 st PCR産物1μl
PCR液量　　：50μl
DNA Polymerase：TaKaRa Ex Taq

　↓
72℃、5 min　3％ Agarose gel
Lane M：pHY Marker (100 ng)