TaKaRa LA Taq®

GC richな繰り返し配列の増幅
　―ハンチントン病遺伝子の増幅―

TaKaRa LA TaqとGC Bufferおよび従来のLA PCR Bufferをそれぞれ組み合わせたものと、B社製GC Kitを用いて、ハンチントン病遺伝子（HD遺伝子IT15 CAGリピート；サイズ262 bp/GC含量73%、358 bp/GC含量71.5%）を増幅、比較検討した。その結果、従来のLA PCR BufferやB社製GC Kitを用いたものでは、いずれのバンドも検出できなかったが、GC Bufferを用いたTaKaRa LA Taqでは、2本のバンドがはっきり検出できた。

■ PCR反応条件

TaKaRa LA Taqの場合
94℃、1 min　
↓
94℃、30 sec　30 cycles
60℃、30 sec
72℃、1 min
↓　
72℃、5 min

B社製GC Kit（マニュアルに従った）
94℃、1 min　
↓
94℃、30 sec　30 cycles
68℃、3 min
↓　
68℃、3 min

■ 結果

レーン 酵素 バッファー template量
1： TaKaRa LA Taq 10×LA PCR Buffer 100 ng
2： 2×GC Buffer I 100 ng
3： 2×GC Buffer II 100 ng
4： B社製GC Kit 同キット添付バッファー 100 ng
M： 100 bp DNA Ladder Marker
Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
ゲル：3% NuSieve 3：1 Agarose gel
アプライ量：8 μl/50 μl

  TaKaRa LA Taq®