C179, F49, 9D6抗体を用いたインフルエンザウイルスのタイピング
【方法】
96穴マイクロプレートに単層培養されたMDCK細胞に、患者うがい液より分離したウイルスを3穴ずつ接種し、35℃で16時間培養する。上清を除き、PBSで洗浄した後、99％エタノールで10分間固定し、1％BSAでブロッキング操作を行う。次に各抗体（終濃度1 μg/ml）、ウサギ抗マウスIgG抗体（Organin Teknika社）、およびペルオキシダーゼ－マウス抗ペルオキシダーゼ複合体（Organin Teknika社）を順次反応させる（PAP法）。この場合、各々の反応は37℃で30分間行い、反応後はPBSで洗浄する。最後にジアミノベンジジンを加えて発色させた後、顕微鏡で観察する。この3穴の染色結果のパターンより、インフルエンザウイルスのタイピングを行う。
【結果】
96穴マイクロプレートに単層培養されたMDCK細胞に、患者うがい液より分離したウイルスを3穴ずつ接種し、35℃で16時間培養する。上清を除き、PBSで洗浄した後、99％エタノールで10分間固定し、1％BSAでブロッキング操作を行う。次に各抗体（終濃度1 μg/ml）、ウサギ抗マウスIgG抗体（Organin Teknika社）、およびペルオキシダーゼ－マウス抗ペルオキシダーゼ複合体（Organin Teknika社）を順次反応させる（PAP法）。この場合、各々の反応は37℃で30分間行い、反応後はPBSで洗浄する。最後にジアミノベンジジンを加えて発色させた後、顕微鏡で観察する。この3穴の染色結果のパターンより、インフルエンザウイルスのタイピングを行う。
詳しい方法と結果は下記文献をご覧ください。
| ・ | 植田稔、奥野良信（1997）日本胸部臨床 56巻11号：S116-S121 |
| ・ | Ueda, M. et al（1998）J. Clin. Microbiol. 36, 340-344. |
【結果】
抗体 タイピング C179 F49 9D6 ＋ － － H1N1またはH2N2 － ＋ － H3N2 － － ＋ B
