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Q&A

Alkaline Phosphatase (Calf intestine) (CIAP)

Alkaline Phosphatase (CIAP)

Q1 制限酵素処理後、バッファー置換せずにCIAPを使ってもよいか?
A1 最適条件に比べ数分の1から10分の1に効率が落ちます。しかし通常、大過剰量使用するので、DNAが5'突出末端なら問題ありません。5'陥没末端ならできるだけバッファー置換し、高めの温度(50℃くらい)で使用してください。

Q2 CIAPのイオン要求性は?
A2 Zn2+は不要(酵素タンパクと結合している)。Mg2+は0.5 mMで0 mMの場合の約3倍活性化します。
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