Alkaline Phosphatase (Calf intestine) (CIAP)

Cloned
反応用バッファー添付
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
2250A

TKR

タカラバイオ(株)
Alkaline Phosphatase(Calf intestine)
修飾酵素 カスタム製造について
1,000 U ¥11,500
¥9,200
2020/05/25~
2020/09/30

説明書・データシート・ベクター情報
2250A
2250B(A×5)

TKR

タカラバイオ(株)
Alkaline Phosphatase(Calf intestine)
修飾酵素 カスタム製造について
5,000 U ¥46,000
¥36,800
2020/05/25~
2020/09/30

説明書・データシート・ベクター情報
2250B(A×5)
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製品説明

本酵素は大腸菌由来の酵素同様、ほとんどすべてのリン酸モノエステル結合を分解するが、リン酸ジエステルおよびリン酸トリエステル結合は分解しない。ATP等のピロリン酸結合の分解速度は低い1)

保存

-20℃

濃度

30 U/μl

形状

10 mM Tris-HCl(pH8.0)
50 mMKCl
1 mMMgCl2
0.1 mMZnCl2
50%グリセロール

添付Buffer組成(10×)

500 mMTris-HCl(pH9.0)
10 mMMgCl2

活性の定義

37℃、pH9.8において、1分間に1 μmolのp-nitrophenolを遊離させる酵素活性を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

1 Mdiethanolamine緩衝液(pH9.8)
0.5 mMMgCl2
15 mMp-nitrophenyl phosphate

純度

30 Uの本酵素と、1 μgのλDNA-Hind III 分解物とを37℃、16時間反応させても、DNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
30 Uの本酵素と、1μgのpBR322 DNAとを37℃、1時間反応させても、DNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
18 Uの本酵素と、1 μgの16S,23S rRNAとを37℃、16時間反応させても、RNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

使用上の注意

本酵素は保存条件では安定であるが、キレート剤存在下65℃、30分間の熱処理で99%以上の活性が不可逆的に失活する。ただし使用条件によってはこれでも不充分な場合もあるので、完全に失活させるためにはフェノール処理することが望ましい。

用途

  • DNAの5’末端標識のための前処理、あるいはセルフライゲーションを防ぐためのベクターDNAフラグメントの脱リン酸化処理
  • 平滑末端や5’陥没末端の脱リン酸化には、BAP C75(製品コード 2120A/B)を用いた高温(55~60℃)での反応が望ましい。

起源

Yeast carrying the plasmid which encodes the gene of calf intestine alkaline phosphatase

一般的性質

  • 分子量
    約100,000
  • サブユニット
    分子量約50,000のサブユニット2つからなる、Zn2+を含む糖タンパク質
  • 至適pH
    pH10付近(高基質濃度)3)
    pH8付近(低基質濃度)
  • 活性化剤
    Tris等アルコール化合物、Mg2+
  • 安定性
    非常に安定
    65℃、30分の熱処理で可逆的に失活する。完全に失活させるためにはフェノール処理が必要である。
注意事項
  • 弊社の取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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