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Protocols

Yatalase(糸状菌細胞壁溶解酵素)

Yatalaseを用いるプロトプラスト調製条件例

表3 プロトプラスト調製条件例
菌株 培地 培養条件 プロトプラスト調製条件 *
Aspergillus oryzae Czapek-Dox
+0.5% Casamino acid(pH5.6)
30℃, 20 hr
Shake culture
(Rotary at 140 rpm.)
2% Yatalase sol.
0.6 M(NH42SO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 2-3 hr
Aspergillus kawachi Czapek-Dox
+0.5% Casamino acid(pH5.6)
30℃, 20 hr
Stationary culture
2% Yatalase sol.
0.6 M(NH42SO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 2-3 hr
Aspergillus terreus
Penicillium citrinum
Penicillium lanosum
Tricoderma koningii
Dextrin-peptone(pH5.5) 30℃, 20 hr
Shake culture
(Rotary at 140 rpm.)
2% Yatalase sol.
0.6 M(NH42SO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 2-3 hr
Mucor hiemalis
Rhizopus nigricans
2% Malt extract 30℃, 12 hr
Stationary culture
(Sporangiospores in germ)
2% Yatalase sol.
0.5 M MgSO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 4 hr
Pleurotus ostreatus
Coprinus cinereus
Lentinus edodes
OSG or MYGmedium(pH5.5) 25-30℃, 3-4 days
Stationary culture
2% Yatalase sol.
0.6 M MgSO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 2-3 hr
Monascus sp. Dextrin-peptone(pH5.5) 25℃, 20 hr
Shake culture
(Rotary at 140 rpm.)
2% Yatalase sol.
0.6 M(NH42SO4, 50 mM Maleate buffer(pH5.5)
30℃, Reciprocal shaking(at 60-70 rpm.), 2-3 hr


* 50 mM Maleate buffer(pH5.5)の代わりに 10 mM リン酸ナトリウムバッファー(pH6.0)の使用も可能です。
また、0.6 M(NH42SO4の代わりに、0.8 M NaClの使用も可能です。
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