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Protocols

PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix

RT-PCRを行う場合

PrimeScript™ IV 1st strand cDNA Synthesis Mix(製品コード 6215A)
1st strand cDNA合成反応液はそのままPCRの鋳型として使用することができます。その場合、1st strand cDNA合成反応液のPCR反応への持込みは、PCR反応液量の1/10量以下となるようにしてください。また、鋳型量がPCRの増幅効率に影響するPCR酵素もありますので、使用するPCR酵素の取扱説明書を参考にして適切な鋳型量を検討することをお勧めします。
RT-PCRにおいて非特異的な増幅が生じたり増幅産物が得られない場合、cDNA合成反応液をRNase H処理することによって、PCR増幅が改善されることがあります。
[ 推奨PCR酵素 ]
成功率、特異性を求めるPCRに:Tks Gflex DNA Polymerase
正確なPCRに:PrimeSTAR Max DNA Polymerase、PrimeSTAR HS DNA Polymerase、PrimeSTAR GXL DNA Polymerase
増幅効率の良いPCRに:TaKaRa Ex TaqTaKaRa Ex Taq HS、PrimeSTAR GXL DNA Polymerase
長鎖のPCRに:TaKaRa LA TaqTaKaRa LA Taq HS、PrimeSTAR GXL DNA Polymerase
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