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Application

TaKaRa LA Taq®

ヒトゲノムDNAを鋳型としたLA PCR

鋳型 DNA ヒトゲノムDNA
Target β-globin cluster regionおよびTPA gene region
増幅サイズ 17.5 kb β-globin cluster region
21.5 kb β-globin cluster region
27 kb  TPA gene region
■ 反応液組成

使用量終濃度
ヒトゲノムDNA (500 ng/μl)1 μl500 ng/50 μl
10 × LA PCR Buffer II (Mg2+ plus)5 μl[1 × ]
dNTP Mixtur8 μl各 400 μM each
Sense Primer (20 pmol/μl)0.5 μl0.2 μM
Antisense Primer (20 pmol/μl)0.5 μl0.2 μM
TaKaRa LA Taq0.5 μl2.5 U/50 μl
滅菌精製水34.5 μl 
Total50 μl 
■ PCR条件
94℃、1 min
 ↓
98℃、10 sec.
68℃、15 min.(17.5 kb、21.5 kb) or 20 min.(27 kb)
30 cycles
 ↓
72℃、10 min
■ 結果
各5 μl/泳動
0.4% Agarose gel
Lane 1:λ-Hind III digest
Lane 2:17.5 kb
Lane 3:21.5 kb
Lane 4:27 kb
Lane 5:High Molecular Weight DNA Markers (BRL)
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