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Application

Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End)

PCR 反応に用いる酵素の比較
Mighty Cloning Kit (Blunt End) 製品コード 6026

PrimeSTAR HS DNA Polymerase 、TaKaRa TaqTaKaRa Ex TaqTaKaRa LA TaqTaKaRa Ex Taq Hot Start Versionを用い、λ DNAを鋳型として増幅した1 kbpのPCR産物を、本キットのプロトコールに従ってpUC118 Hinc II / BAPにクローニング後、E. coli JM109コンピテントセルを形質転換してカラーセレクションを行った。なお、インサートの有無はPCR(プライマー;M13 Primer M4およびRV)によって確認した。
PCRに使用したDNA
polymerase
白色コロニー/青色コロニー
(/50 ng pUC118 DNA)
インサート/白色コロニー
PrimeSTAR HS DNA Polymerase8.9×104 / 4.5×1039 / 10
TaKaRa Taq1.2×105 / 1.0×1049 / 10
TaKaRa Ex Taq1.5×105 / 1.0×10410 / 10
TaKaRa LA Taq8.3×104 / 5.5×1039 / 10
TaKaRa Ex Taq Hot Start Version8.1×104 / 6.3×10310 / 10
※使用したコンピテントセルは3.6×108 コロニー/μg pUC118 DNAの形質転換効率を持つ。
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