Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)

生物学的タイター測定済みのレトロウイルスベクターを用いた検量線の作成

【方法】

まず、血清入り培地(DMEM、10% FBS含有)で一過性に調製したZsGreen遺伝子搭載レトロウイルスを、HT1080細胞に感染させてFACS解析を行い、生物学的タイターを算出した(1.82×106 ivp/ml)。
次に、このレトロウイルスベクターを同培地で原液、10倍、100倍、1,000倍に希釈し、DNase I処理を行った後、リアルタイムRT-PCRを行って検量線を作成した。

【結果】

下図に示すように、精度の高い検量線が得られた。
生物学的タイター測定済みのレトロウイルスベクターを用いた検量線
生物学的タイター測定済みのレトロウイルスベクターを用いた検量線

  Retrovirus Titer Set (for Real Time PCR)