長鎖DNAもメチル化DNAもOK!高効率コンピテントセル

E. coli HST08 Premium Electro-Cells

  • ●SOC培地添付
  • ルーチンクローニングはもちろん、長鎖DNA(10 kb以上)のクローニングにもおススメ!
  • メチル化DNAのクローニングも可能
  • エレクトロポレーション法によるcDNAライブラリーやゲノムライブラリー、BACライブラリーの作製に最適
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 9028 9028 E. coli HST08 Premium Electro-Cells
1 Set(50 μl×10) ¥20,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

Electro-Cellsは、エレクトロポレーション法のために調製したコンピテントセルである。この方法は高電圧パルスで細胞膜を破断することにより DNAを細胞内に移入するもので、形質転換効率および結果の再現性に優れており、少量のサンプルを短時間で大腸菌に導入する際、特に威力を発揮する。
E. coli HST08 Premiumは外来のメチル化DNAを切断する遺伝子群mrr-hsdRMS-mcrBC, とmcrAを欠失している。その上、非常に高い形質転換能力を持っているため、メチル化されたDNAのクローニングから、遺伝子ライブラリーの作製、BACベクターなどを使用した長鎖ゲノムライブラリー作製等に広く使用できる。
また長鎖プラスミドDNAの形質転換能力にも優れており、同様の遺伝子型を持つ他のコンピテントセルと比較してコロニー形成速度も速いため、TaKaRa DNA Ligation Kit LONG(製品コード 6024)と組み合わせることで、10 kb以上の長鎖DNA断片のクローニングやライブラリー作製も容易に行える。
pUC系プラスミドでの形質転換の際には、β-ガラクトシダーゼのα-相補性を利用し、X-Gal添加により組換え体の選別が容易となる。
(X-Gal:5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galactoside)

内容

E. coli HST08 Premium Electro-Cells50 μl×10本
pUC19 DNA (10 pg/μl) 10 μl
SOC Medium*1 ml×10本
* SOC Mediumの組成 :
2%Tryptone
0.5%Yeast extract
10 mMNaCl
2.5 mMKCl
10 mMMgSO4
10 mMMgCl2
20 mMGlucose
【ご注意】
SOC Mediumを溶かした際に、稀に沈殿が生じる場合がありますが、品質には全く問題ありません。
沈殿が生じた場合は、室温で混ぜるかもしくは37℃で数分間温めて沈殿を溶かしてご使用ください。

保存

-80℃

品質

1)形質転換効率
取扱説明書の方法に従い、10 pgのpUC19プラスミドDNAで形質転換し、Amp+のプレートでコロニーを選別した。このとき、>1×109 transformans/μl pUC19プラスミドDNAの効率を得た。
2)β-ガラクトシダーゼのα-相補性の確認
pUC19DNAを用いて形質転換を行い、100 μg/mlのアンピシリン、60 μg/ml X-Galを含む L-寒天培地にプレートした場合、青色のコロニーが出現することを確認している。

Genotype

F, endA1, supE44, thi-1, recA1, relA1, gyrA96, phoA, Φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF)U169, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC), ΔmcrA, λ
(K-12株由来大腸菌)

Cell density

1×1010 bacteria/ml

純度

50 μlのE. coli Electro-Cellsを各種抗生物質を含むLB-寒天培地にプレートした場合、コロニーは形成されない。

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