本酵素は、Avian myeloblastosis virusから単離された、分子量約157,000 daltonsのαβ型holoenzymeの逆転写酵素である。本酵素は、Nuclease-freeにまで高純度に精製したものであり、約10 kbのRNAを鋳型としたcDNA合成に使用できることを確認している。本酵素はcDNA合成活性とともに、RNase H活性も保持している。

－80℃凍結保存（数回の凍結、融解の繰り返しではほとんど活性は低下しないが、なるべく避けること）または短期間（6ヵ月）であれば－20℃保存でもよい。

15～40 units/μl

200 mM	リン酸カリウム緩衝液（pH7.2）
2 mM	DTT
0.2％	Triton X-100
50％	グリセロール

250 mM	Tris-HCl（pH8.3）
500 mM	KCl
20 mM	DTT
50 mM	MgCl2

注意）長鎖cDNAの合成には、添付Bufferは 1/10希釈での使用が望ましい。

Poly（rA）・oligo（dT）_12－18を鋳型／プライマーとし、37℃で10分間に1 nmolの[³H] dTTPを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。

50 mM	Tris-HCl（pH8.3）
40 mM	KCl
6 mM	MgCl2
4 mM	DTT
0.4 mM	Poly（rA）・（dT）12-18
0.5 mM	[3H]dTTP
2～4 U	RTase XL (AMV)

以下の方法により、メーカーにて品質検定が行われている。

1. cDNA合成反応
Poly A-tailed RNA Ladder（0.5 ～ 9.0 kb）1.0 μgと本酵素5.0 Uを41℃で1時間反応後、アルカリゲル電気泳動およびTCA沈澱により、転写効率および完全長cDNA 合成率を確認している。

2. RNase Assay
本酵素とRNA Ladder（0.5～9.0 kb）を1 μg RNAあたり20 Uの割合で37℃にて2時間反応させ、RNAのアガロースゲル電気泳動により、RNase A当量として8×10^-8 U以下であることを確認している。

3. DNase Assay（endonuclease、exonuclease）
50 Uの本酵素と0.5 μgのφX174 Hae III fragmentsを、反応液中37℃にて3時間反応させ、電気泳動によりDNase I当量として1.25×10^-4 U以下であることを確認している。

• 1st strand cDNAの合成
• RNA-PCR
• cDNAプローブの調製

Avian myeloblastosis virus（AMV）

• 分子量
  αβ型：157,000