Basal Bufferの塩濃度が酵素活性に及ぼす影響

Basal Buffer中の塩濃度と酵素活性との関係を下記の表にまとめた。塩以外のBuffer組成および反応条件は、Basal Buffer組成の項に記載している通りである(「Basal Buffer組成について」を参照)。数値は、活性測定Bufferでの酵素活性を100としたときの相対活性を示している。

1.至適塩濃度が低い酵素群

制限酵素 濃度(mM) 反応温度
(℃)
pH(Tris)at25℃
0 10 20 40 50 60 80 100 125 150 175
Acc II NaCl 200
160 160
160
30
<20
37 7.5 (10 mM)
KCl 200
200 200
160
60
<20
Afa I NaCl 50
100
100
80 80
30
37 8.0 (10 mM)
KCl 50
100
100
100 120
30
Alu I NaCl 120
120 120
120
120
40
37 7.5 (10 mM)
KCl 120
100 100
100
100
30
Apa I NaCl 120 120 80 60
30
<10


37 7.5 (10 mM)
KCl 120 120 120 60
40
<10


ApaL I NaCl 250
200 120 120 100 50 10


37 8.0 (10 mM)
KCl 250
200 120 120 50 40 10


Bal I NaCl 100
40 20
<10 <10 <10


37 8.5 (20 mM)
KCl 100
60 20
10 <10 <10


BspT104 I NaCl 80
100 60
30 20 <20


37 7.5 (10 mM)
KCl 80
80 60
30 20 <20


Bsp1286 I NaCl 100 70 70 40

10 <10


30 7.5 (10 mM)
KCl 100 100 100 50

10 <10


BssH II NaCl 100
120 100 100 100 100 80
80
50 7.5 (10 mM)
KCl 100
120 100 100 100 60 60
60
Hap II NaCl 80
60 50
50
20
<10
37 7.5 (10 mM)
KCl 80
100 80
60
30
<10
Kpn I NaCl 80
80 50
30
<5
0
37 7.5 (10 mM)
KCl 80
80 50
30
<5
0
Mbo II NaCl 80 80 70 50

30

<20
37 7.5 (10 mM)
KCl 80 100 80 70

40

<20
Mfl I NaCl 100 100 100 100

60

0
37 8.0(10 mM)
KCl 100 100 100 100

90

50
Msp I NaCl 60
60 60
60
40
<20
37 7.4 (10 mM)
KCl 60
60 60
60
40
<20
Mun I NaCl 150
150
100
50 40
<20
37 7.5 (10 mM)
KCl 150
150
100
50 40
<20
Nae I NaCl 100
120 80
50
0


37 8.0 (10 mM)
KCl 100
120 80
50
0


Nhe I NaCl 120
150
100
60 40
10
37 7.5 (10 mM)
KCl 120
200
200
150 150
40
Nsb I NaCl 100


100

30
<20
37 7.9 (33 mM)*
KCl 100


100

50
<20
PmaC I NaCl 100
100 100
70 30 <20
0
37 7.5 (10 mM)
KCl 100
100 100
70 30 <20
0
Pvu II NaCl 100
120 120
100
30
10
37 7.5 (10 mM)
KCl 100
100 70
60
50
20
Sac I NaCl 80
80 80
60
20
10
37 8.0 (10 mM)
KCl 80
80 80
60
20
10
Sac II NaCl 40
40
20 <10 <10 <10
<10
37 7.5 (10 mM)
KCl 40
40
20 <10 <10 <10
<10
は、TaKaRa Basal Bufferの塩濃度を示している。
* Tris-acetate(37℃)

2.至適塩濃度が中程度の酵素群

制限酵素 濃度(mM) 反応温度
(℃)
pH(Tris)at25℃
0 20 40 50 60 80 100 125 150 175 200
Aat II NaCl 20 <10 <10 <10 <10 <10 <10
<10

37 8.0 (10 mM)
KCl 20 100 120 90 80 20 10
<10

Acc I NaCl 20 40 80
80 60 20
<10

37 7.5 (10 mM)
KCl 20 40 60
80 30 <10
<10

Afl II NaCl 60 80 100
80 60 40



37 8.0 (10 mM)
KCl 60 80 120
80 80 60



Aor51H I NaCl 50 70 100
120 120 100
<30

37 8.0 (10 mM)
KCl 50 100 120
120 120 100
<30

Ban II NaCl 80 80 80 80 100 100 100
60

37 8.0 (10 mM)
KCl 80 80 100 100 100 80 80
80

Bci T130 I NaCl 60

80
100 80 80 80 60
37 8.5 (20 mM)
KCl 60

60
100 100 60 60 60
Bcn I NaCl 40 60 60
100 60 60



37 8.2 (20 mM)
KCl 40 50 60
80 60 50



Bpu1102 I NaCl 60 60 60
100 30 30



37 8.2 (20 mM)
KCl 60 30 30
30 30 30



Bsp1407 I NaCl <10 40
60
60 80
40
<10 37 7.5 (10 mM)
KCl <10 40
80
80 100
60
20
BstP I NaCl 20 30
60
70 100
50
20 60 8.0 (50 mM)
KCl 20 20
60
70 100
50
10
Cpo I NaCl 10 20
50
60 100
<10

30 8.0 (10 mM)
KCl 10 20
40
60 100
<10

Dde I NaCl 80     100

80
80
20 37 8.0 (50 mM)
KCl 80

100

100
100
40
Dra I NaCl 50 60 80
80
80
50

37 7.5 (10 mM)
KCl 50 60 80
80
80
50

Eae I NaCl 120 160 160
160 80 20
<20

37 8.0 (10 mM)
KCl 120 160 160
160 80 20
<20

Eam1105 I NaCl 50 80
150
100 80
<10

37 8.5 (20 mM)
KCl 50 80
150
100 100
<10

EcoO65 I NaCl 40 50
70
120 100
20
5 37 7.5 (10 mM)
KCl 40 50
70
120 100
20
5
EcoO109 I NaCl 100 100 120
120 100 60
0

37 8.0 (10 mM)
KCl 100 120 160
120 120 80
0

EcoR I NaCl 120 120 120 120 100 50 30
<10

37 7.5 (100 mM)
KCl 120 120 120 120 80 40 10
<10

Eco81 I NaCl 30 100 100
30 0 0



37 8.5 (10 mM)
KCl 30 160 160
60 20 0



Fok I NaCl 10 20 70
100 100 50
30

37 7.5 (10 mM)
KCl 10 40 100
100 100 100
40

Hae II NaCl 80 80 100
120 80 50
<20

37 7.5 (10 mM)
KCl 80 80 100
150 100 80
30

は、TaKaRa Basal Bufferの塩濃度を示している。
制限酵素 濃度(mM) 反応温度
(℃)
pH(Tris)at25℃
0 20 40 50 60 80 100 125 150 175 200
Hae III NaCl 60 70 80
100 100 100
80

37 7.5 (10 mM)
KCl 60 70 80
100 100 100
100

Hha I NaCl 80
100 100
100
150
150
37 7.5 (10 mM)
KCl 80
100 100
100
150
150
Hinc II NaCl 100 100 100
100 100 80
20

37 8.0 (10 mM)
KCl 100 100 100
100 100 100
20

Hind III NaCl 20
60
80 40 <20
<10
<10 37 7.5 (10 mM)
KCl 20
80
80 40 <20
<10
<10
Hin1 I NaCl 80 160
160
160 120
40
<10 37 9.1 (10 mM)
KCl 80 80
80
80 60
40
10
Nco I NaCl 160 240
300
300 240
40
<10 37 8.9 (10 mM)
KCl 160 240
300
300 240
30
<10
Nde I NaCl <20 <20
40
100 100
60
<20 37 8.0 (10 mM)
KCl <20 <20
40
100 100
60
<20
PshA I NaCl 60 80 80
100 80 40
<20

37 8.5 (10 mM)
KCl 60 100 160
160 160 120
80

PshB I NaCl 40 100
100
60 20
<20
<20 37 8.5 (10 mM)
KCl 40 100
80
50 <20
<20
<20
Psp1406 I NaCl 10 20
40
40 30
10
<10 37 7.5 (10 mM)
KCl 10 20
60
100 100
80
20
RspRS II NaCl 80

100

80
80

60 7.9 (33 mM)
KCl 80

100

80
80

Sfi I NaCl 20 60
100
100 40
<20
<20 50 7.5 (10 mM)
KCl 20 60
100
60 40
<20
<20
Sma I NaCl 30 10 0
0
0
0

30 8.0 (10 mM)
KCl 30 100 100
100
50
0

SnaB I NaCl 50 100
100
100 60



37 8.0 (10 mM)
KCl 50 60
80
50 20



Spe I NaCl 80 100 120
100 100 80
40

37 7.5 (10 mM)
KCl 80 100 100
120 100 80
40

Sse8387 I NaCl 40 50
70
70 30
20

37 7.5 (10 mM)
KCl 40 50
80
100 70
<20

Ssp I NaCl 10 30
50
100 100
20
<10 37 7.5 (10 mM)
KCl 10 30
60
100 80
20
<10
Taq I NaCl 40

100

100
50
20 65 8.3 (10 mM)
KCl 40

80

100
60
<20
Tth111 I NaCl 30 40 60 120 90 60 40
<10

65 7.5 (20 mM)
KCl 30 40 50 90 90 50 40
<10

Van91 I NaCl <10 10
80
100 100
80
<20 37 8.5 (10 mM)
KCl <10 10
60
100 100
80
<20
Xba I NaCl <10

60

120
40
<10 37 7.5 (10 mM)
KCl <10

60

100
40
10
は、TaKaRa Basal Bufferの塩濃度を示している。
Tris-asetate(25℃)

3.至適塩濃度が高い酵素群

制限酵素 濃度(mM) 反応温度
(℃)
pH(Tris)at25℃
0 20 40 50 60 80 100 125 150 175 200
Acc III NaCl <10 <10
10
40 80
120
100 60 8.5 (10 mM)
KCl <10 <10
10
40 120
160
120
Aor13H I NaCl <20 20 70
70 70 100
50
<20 55 8.5 (10 mM)
KCl <20 20 70
70 70 100
60
<20
BamH I NaCl 40

100

120
60
20 30 8.0 (10 mM)
KCl 40

100

120
60
40
Bgl I NaCl <10 <10
10
30 30
50
20 37 8.5 (20 mM)
KCl <10 <10
10
30 50
100
50
Bgl II NaCl <10

20

100
200
200 37 7.5 (10 mM)
KCl <10

20

100
120
120
Bln I NaCl <10

20

50
80
80 37 7.5 (10 mM)
KCl <10

20

80
200
200
BmeT110 I NaCl <20

20

70
150
150 37 8.5 (50 mM)
KCl <20

<20

60
100
120
BmgT120 I NaCl <20

60

160
250
60 37 7.5 (50 mM)
KCl <20

20

20
50
80
BspT107 I NaCl <20

30

80
80
40 37 8.5 (20 mM)
KCl <20

40

100
100
20
BstX I NaCl 40

40

60
80
120 45 7.5 (10 mM)
KCl 40

40

40
80
100
Bst 1107 I NaCl 10 30
60
80 120
100
20 37 8.5 (20 mM)
KCl 10 50
80
80 100
80
30
Cfr10 I NaCl 40

60

80
20

37 8.5 (20 mM)
KCl 40

60

100
80

Cla I NaCl 20 60 100 100 100 120 100
60
20 30 8.0 (10 mM)
KCl 20 60 100 100 100 150 100
60
40
EcoR V NaCl 0

20

80
100
50 37 7.5 (10 mM)
KCl 0

20

70
80
80
EcoT14 I NaCl 0

20

100
100
50 37 8.0 (10 mM)
KCl 0

20

60
90
50
EcoT22 I NaCl 30 30 40
40 80 80
120
60 37 8.0 (10 mM)
KCl 30 30 40
40 60 80
120
60
Eco52 I NaCl 0

10

100
20
0 37 8.9 (10 mM)
KCl 0

10

70
20
0
Fba I NaCl <10 <10
<10
20 50
100
20 37 8.0(10 mM)
KCl <10 <10
<10
20 50
100
30
Hinf I NaCl <20

80

100
120
100 37 7.5 (10 mM)
KCl <20

80

100
120
100
Hpa I NaCl 10

30

10
10
10 37 7.5 (10 mM)
KCl 10

30

100
70
30
Mbo I NaCl 30

40

50
100
100 37 8.0 (10 mM)
KCl 30

40

70
100
100
Mlu I NaCl 40

50

80
100
100 37 7.5 (10 mM)
KCl 40

50

70
80
100
Not I NaCl <5 <5
10
40 60
60
20 37 7.5 (10 mM)
KCl <5 <5
10
30 50
100
20
Nru I NaCl 0

<30

30
30
<30 37 7.5 (10 mM)
KCl 0

<30

30
100
100
Pst I NaCl 30 50 60
60 60 80
140

37 7.5 (20 mM)
KCl 30 60 80
80 80 90
140

Pvu I NaCl 10

50

60
60
50 37 8.0 (10 mM)
KCl 10

40

70
120
250
Sal I NaCl 0

0

40
200 200 200 37 7.5 (10 mM)
KCl 0

0

30
200 200 200
Sau3A I NaCl 50

80

100
80
10 37 7.5 (10 mM)
KCl 50

100

100
100
100
Sca I NaCl 0

10

50 100 80
20 37 7.5 (10 mM)
KCl 0

5

50 100 80
40
Smi I NaCl <20

30
50 100
200
100 30 7.5 (50 mM)
KCl <20

30
50 50
200
200
Sph I NaCl 10 20
30
40 70
100
100 37 8.0 (10 mM)
KCl 10 20
20
40 60
100
30
Stu I NaCl 50

100

100 80 30
<10 37 8.0 (10 mM)
KCl 50

100

100 80 30
<10
VpaK11B I NaCl <10

10

30
50
70 30 7.5 (20 mM)
KCl <10

10

30
70
100
Xho I NaCl <10

30

100
70
20 37 7.5 (10 mM)
KCl <10

20

70
60
20
Xsp I NaCl 40

40

20
<20
<20 37 8.5 (20 mM)
KCl 40

80

100
20
20
は、TaKaRa Basal Bufferの塩濃度を示している。

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