哺乳類用エピトープタグ(HA or c-Myc)ベクター

  • 哺乳類細胞内でタンパク質を構成的に発現
  • エピトープタグによって迅速かつ効率的に精製、同定および局在部位の決定が可能
  • 酵母ツーハイブリッドで得られた結果を哺乳類細胞で確認
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 631604 Z1604N pCMV-Myc & pCMV-HA Vector Set
1 Set ¥70,000
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 635689 Z5689N pCMV-Myc Vector Set
1 Set ¥67,200
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CLN 635690 Z5690N pCMV-HA Vector Set
1 Set ¥67,200
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CLN 631207 Z1207N HA-Tag Polyclonal Antibody
100 μg ¥48,300
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CLN 631206 Z1206N c-Myc Monoclonal Antibody
200 μg ¥46,200
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CLN 631208 Z1208N c-Myc Monoclonal Antibody-Agarose Beads
1 ml ¥76,700
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製品説明

哺乳類細胞発現用のpCMV-MycおよびpCMV-HA Vectorの使用により、任意のタンパク質にc-Mycあるいはヘマグルチニン(HA)エピトープタグを付加して発現させることができる。c-Myc*1およびHA*1は性状がよく知られた免疫反応性の高いエピトープタグであるため、共免疫沈降アッセイやウェスタンブロット分析により簡単に検出できる。さらに、低分子タグであるため、融合タンパク質の機能を阻害しにくいと考えられる。なお、本ベクターではCMVプロモーターを使用し、広範な哺乳類細胞で高レベルな発現を構成的に行う。

pCMV-Myc & pCMV-HA Vector SetはClontechのMatchmaker Gold Two-Hybrid Systemで同定したタンパク質相互作用の確認に最適である。pCMV-MycおよびpCMV-HAのマルチクローニングサイトは、Clontechのtwo-hybridクローニングベクターと互換性を有しており*2、Matchmakerベクター由来のインサートを簡単にエピトープタグ融合ベクターに移すことが可能である。タンパク質の相互作用を検証する際にはまず、おとりタンパク質のインサートを一方のベクターに、標的のインサートをもう一方のベクターにクローニングする。次いで、両方のベクターを哺乳類細胞にコトランスフェクトし、最後に免疫沈降を行うことによりタンパク質の相互作用を確認する。本ベクターセットにはc-Myc Monoclonal AntibodyおよびHA-Tag Polyclonal Antibodyが添付されている。これらはウェスタンブロット、ELISA、免疫染色に使用可能である。また、インサートが正しいリーディングフレームに収まっていることを確認するためのシーケンシングプライマーも添付されている。

*1HA タグシーケンス:ACC ATG TAC CCA TAC GAT GTT CCA GAT TAC GCT
Mycタグシーケンス:ATG GAG CAG AAG CTG ATC TCA GAG GAG GAC CTG
*2一部のMCSのみ互換性があります。制限酵素によっては互換性はありません。


図1. pCMV-MycとpCMV-HAベクターマップ
表1. 各ベクターセットのコンポーネント
製品コード製品名コンポーネント
631604pCMV-Myc & pCMV-HA Vector SetpCMV-Myc-N Vector (500 ng/μl)
pCMV-HA-N Vector (500 ng/μl)
c-Myc Monoclonal Antibody (200 μg/ml)
HA-Tag Polyclonal Antibody (IgG 1 mg/ml)
pCMV Sequencing Primer (20 μM)
635689pCMV-Myc Vector SetpCMV-Myc-N Vector (500 ng/μl)
pCMV-Myc-C Vector (500 ng/μl)
635690pCMV-HA Vector SetpCMV-HA-N Vector (500 ng/μl)
pCMV-HA-C Vector (500 ng/μl)

内容

pCMV-Myc & pCMV-HA Vector Set
(製品コード 631604)
・pCMV-Myc Vector
・pCMV-HA Vector
・c-Myc Monoclonal Antibody
・HA-Tag Polyclonal Antibody (IgG)
・pCMV Sequencing Primer

pCMV-Myc & pCMV-HA Vector Set
(製品コード 635689)
・pCMV-Myc-N Vector (500 ng/μl)
・pCMV-Myc-C Vector (500 ng/μl)

pCMV-HA Vector Set
(製品コード 635690)
・pCMV-HA-N Vector (500 ng/μl)
・pCMV-HA-C Vector (500 ng/μl)

保存

#631604、631206、631207、635689、635690:-20℃
#631208:4℃

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