一般細菌数をリアルタイムPCRで定量

Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit

qPCR試薬の製品名変更について

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR RR240A RR240A Bacteria(tuf gene) Quantitative PCR Kit
  • ライセンス
100回 ¥65,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

本製品は、リアルタイムPCR により一般細菌数を定量するためのキットである。2~4日の培養を必要とする従来法に比べ、迅速に結果を得ることができ、食品・環境分野の自主管理等に有用である。また、培養法では、菌種によって最適な培養条件が異なるため、検体の種類や貯蔵条件等を考慮し、検体に存在する菌種に応じて培地組成や培養温度を工夫する必要があるが、本製品のリアルタイム法では、菌種間での保存性が高く、染色体上に低コピー(1または2コピー)で存在しているタンパク質伸長因子Tu(tuf)遺伝子を検出対象としている為、一度に広範な細菌種の細菌数を測定することができる。

本キットの開発には、東京海洋大学 木村凡先生、高橋肇先生、東洋水産株式会社 田中悠一郎氏にご協力いただきました。

(参考)tuf遺伝子の配列情報から検出可能と推測される菌種
GenBankに登録された1,561 種のバクテリアゲノム配列(2011年11月21日現在)から”tuf”または”elongation factor”という名前が付いている遺伝子配列10,855種を抽出し、本製品のプライマー配列に100%マッチするものをリスト化しました。→リストはこちら

内容

 
(25 μl反応、100回分)
SYBR Premix Ex Taq GC*12×conc.625 μl×2
TUF Primer Mix5×conc.250 μl×2
dH2O 1 ml
ROX Reference Dye*250×conc.50 μl
ROX Reference Dye II*250×conc.50 μl
TUF Positive Control1×105 copies/μl100 μl
EASY Dilution (for Real Time PCR)1 ml×2


*1TaKaRa Ex Taq HS, dNTP Mixture, Mg2+, SYBR Green Iを含む。
*2Thermo Fisher Scientific社のリアルタイムPCR装置など、ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用する。
  • ROX Reference Dye(50×)を添加する機種
    ・ StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
  • ROX Reference Dye II(50×)を添加する機種
    ・ Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
    ・ Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)
  • 添加の必要がない機種
    ・ Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960)
    ・ Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード T700/TP760)

輸送

-20℃/-80℃

保存

SYBR Premix Ex Taq GC(Package1)
4℃保存:6ヵ月安定(長期保存は-80℃)
必ず遮光して保存してください。また、4℃保存する場合には、コンタミネーションに十分注意してください。
長期保存する際は、-80℃で保存してください。(-20℃保存は避けてください。)いったん融解したものは4℃で保存し、6ヵ月を目処にご使用ください。
その他のコンポーネント(Package2)
 -20℃保存

キット以外に必要な機器、試薬(主なもの)

<サンプル懸濁液調製に必要なもの>
希釈水(0.1%ペプトン加生理食塩水等、検体の種類に応じて選択)
ストマッカーおよびストマッカー袋

<DNA抽出に必要なもの>
NucleoSpin Tissue(製品コード 740952.10/.50/.250)
特級エタノール(>99%)
ヒートブロック(56℃および70℃で使用可能なもの)
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
微量高速遠心機
20 mg/ml lysozyme

<リアルタイムPCRに必要なもの>
リアルタイムPCR用増幅装置および専用チューブ
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760)
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies)
StepOnePlus Real-Time PCR System(Life Technologies)など
卓上遠心機
マイクロピペット

補足資料

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700)

定量解析(絶対定量モード)用(PDF、993 K)

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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