7血清型を遺伝子タイピング(O157、O26、O111、O121、O103、O145、O165)

CycleavePCR® EHEC (O抗原型) Typing Kit

  • 4種類のキットで主要な7血清型を遺伝子タイピング
  • プレミックス試薬のため、初心者でも簡単
  • FAMとROXを検出できる幅広い装置で使用可能
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O抗原型遺伝子6種タイピングセットディスカウントキャンペーン実施中
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR CY237 CY237 CycleavePCR® EHEC (O157/O26) Typing Kit
  • ライセンス
20回 ¥28,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR CY238 CY238 CycleavePCR® EHEC (O111/O121) Typing Kit
  • ライセンス
20回 ¥28,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR CY239 CY239 CycleavePCR® EHEC (O103/O145) Typing Kit
  • ライセンス
20回 ¥28,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR CY241 CY241 CycleavePCR® EHEC (O165) Typing Kit
  • ライセンス
50回 ¥69,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

腸管出血性大腸菌の検出においては、まずベロ毒素遺伝子の保有状況によるスクリーニングを行い、ベロ毒素遺伝子陽性であれば、O抗原型の遺伝子タイピングをした上で、分離培養を行う方法が効率的であるとされている。
本シリーズは、腸管出血性大腸菌のO抗原型の遺伝子タイピングを、リアルタイムPCRにより行うためのキットで、O抗原型の主要な血清型の7種類、O157/O26、O111/O121、O103/O145およびO165をそれぞれ検出することができる。各キットには、O157とO26、O111とO121、O103とO145組合せで、それぞれのO抗原合成遺伝子領域の遺伝子を検出するためのFAM 標識プローブとROX標識プローブが含まれている。(下表)二波長を同時にモニタリングすることで、一本のチューブで2種類のO抗原型の検出が可能である。リアルタイムPCRによるタイピングであり、電気泳動が不要で、迅速に結果が得られる。

【ご注意】
  • 製品コードCY237、CY238、CY239では、Lot. AF4P0**およびAK501Zより、製品の容量および価格を変更しました(2015年5月25日)
  • 製品コードCY237、CY238、CY239では、測定結果の判定方法に「+/-判定の基準値」を追加しました。詳しくは取扱説明書のp11、15をご確認ください。(2015年3月24日)
・CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit(製品コード CY237)
・CycleavePCR EHEC (O111/O121) Typing Kit(製品コード CY238)
・CycleavePCR EHEC (O103/O145) Typing Kit(製品コード CY239)
上記3製品を用いる検出法は、厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安全課長通知(平成26年11月20日)
「腸管出血性大腸菌O26、O103、O111、O121、O145及びO157の検査法について」(食安監発1120第1号)に収載されました。
詳しくはこちらをご覧ください

製品 ターゲット遺伝子 蛍光検出波長
CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit O157 FAM
O26 ROX
CycleavePCR EHEC (O111/O121) Typing Kit O111 FAM
O121 ROX
CycleavePCR EHEC (O103/O145) Typing Kit O103 FAM
O145 ROX
CycleavePCR EHEC(O165)Typing Kit O165 FAM

内容

例)CycleavePCR EHEC(O157/O26)Typing Kit(製品コード CY237)

1.2×Cycleave Reaction Mixture2×conc.250 μl
2.O157/O26 Primer/Probe Mix5× conc.100 μl
○3.dH2O1 ml
4.O157 Positive Control40 μl(8回分)
5.O26 Positive Control40 μl(8回分)
○6.EASY Dilution (for Real Time PCR)1 ml
蛍光標識プローブを含んでいますので、遮光に留意してください。

コンポーネント1~3は、製品に添付している小箱を利用し、4~6のコンポーネントとは別に保管してください。
【コンポーネントの説明】
2×Cycleave Reaction Mixture:
PCR反応試薬。反応に必要な酵素、Buffer、dNTP Mixtureを含む。

O157/O26 Primer/Probe Mix:
O157およびO26のO抗原合成遺伝子領域の遺伝子をそれぞれ検出するためのプライマー・プローブ溶液。O157検出用のプローブはFAM、O26検出用のプローブはROXで標識されている。

dH2O:滅菌水
O157 Positive Control:O157検出用陽性コントロール

O26 Positive Control:O26検出用陽性コントロール

EASY Dilution (for Real Time PCR):
Positive Controlを希釈する際に、希釈溶液として使用

保存

-20℃

CycleavePCR EHEC (O157/O26) Typing Kit(製品コード CY237)での検出例

鋳型O157(FAM)O26(ROX)結果判定
dH2O陰性コントロール 正常
O157 PC陽性コントロール 正常
O26 PC陽性コントロール 正常
検体サンプルO157 陽性
O26 陽性
O157およびO26 陽性
O157およびO26陰性
別途PCR反応がないことを確認して判定。
阻害があれば、「判定不能」。

キット以外に必要な機器など(主なもの)

【機器】
リアルタイムPCR装置
 ・Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC(製品コード TP970)
 ・Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960)
 ・Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760)
 ・Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)など
 (詳しくは弊社までお問い合わせください。)
ヒートブロック


【その他】
NucleoSpin® Tissue(製品コード 740952.10/.50/.250)
200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
卓上遠心機

補足資料

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual~定性解析(+/-判定)用~”を用意している。
キットの説明書とあわせて使用する。
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700)

Quick Manual ~定性解析(+/-判定)用~(PDF、946 K)

また、「CycleavePCR EHEC(O抗原型)Typing Kit」を用いて、6種のO抗原型を同時に測定する場合に便利なマニュアルと、結果出力と解析方法を示したマニュアルを用意しています。解析の一例としてご参考ください。
6種のO抗原型を同時に測定する場合の設定方法(PDF、337 K) O抗原型タイピングキットの結果出力と解析方法(PDF、337 K)

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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