プラスミドミニプレップ:迅速精製ながら高収量

NucleoSpin® Plasmid EasyPure

  • pH指示試薬LyseControlにより、大腸菌のアルカリ溶解、中和反応を可視化
  • ~30 μgのプラスミドDNA精製が可能
  • わずか14分間でシーケンスグレードのプラスミドを精製
  • RNaseA溶液を添付、融解作業なしですぐに抽出作業に使用可能
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
MNA 740727.10 U0727A NucleoSpin® Plasmid EasyPure
10回 ¥4,200
説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740727.50 U0727B NucleoSpin® Plasmid EasyPure
  • プラスミドミニプレップ
50回 ¥10,500
¥6,300
2017/08/01~
2017/09/29

説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740727.250 U0727C NucleoSpin® Plasmid EasyPure
  • プラスミドミニプレップ
250回 ¥36,700
¥22,020
2017/08/01~
2017/09/29

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

NucleoSpin Plasmid EasyPureはシーケンスグレードのプラスミドDNAを迅速かつ高収量で精製するスピンカラムキットである。精製過程の洗浄と乾燥をシングルステップで行うため、わずか14分で大腸菌培養液からプラスミドDNAを精製することができる。また、より多くの大腸菌培養液から30 μgまでのプラスミドDNAを調製することができる。
Lysis Bufferには、青い色素を含んだpH指示試薬であるLyseControlが含まれており、大腸菌懸濁液にLysis Bufferを添加すると懸濁液は青色を示す。Neutralization Bufferの添加し混合することで、懸濁液は中和され無色に変化する。LyseControlにより完全なアルカリ溶解・中和を確認することができるため、最適な結果を得ることができる。

原理 シリカメンブレン法
フォーマット ミニスピンカラム
サンプル量 大腸菌培養液2~10 ml
精製ベクターサイズ <15 kb
回収量 15~30 μg
A260/280 1.80~1.85
溶出量 50 μl
精製時間 14分
結合容量 35 μg
培養液量ごとのプラスミドDNA収量比較
図A.培養液量ごとのプラスミドDNA収量比較
NucleoSpin Plasmid EasyPureおよび他社プラスミドDNA精製キット(Q、S、I、F、P)を用いて、大腸菌DH5α培養液 1 ml、 2 ml、3 mlおよび4 mlからプラスミドDNA(pcDNA3.1)の精製および収量の確認を行った。各3連の精製実験を行い、中央値をプロットした。MN: NucleoSpin Plasmid EasyPure

溶出プラスミドDNAのアガロースゲル電気泳動
図B.溶出プラスミドDNAのアガロースゲル電気泳動
溶出プラスミドDNA 50 μlのうち、2.5 μlを1% TAEアガロースゲル電気泳動を行った。
MN: NucleoSpin Plasmid EasyPure

6サンプルの精製に要する実験時間比較
図C.6サンプルの精製に要する実験時間比較
MN: NucleoSpin Plasmid EasyPure

内容

・Resuspension Buffer A1
・Lysis Buffer A2
・Neutralization Buffer A3
・Wash Buffer AQ(Concentrate)
・Elution Buffer AE
・Liquid RNaseA
・NucleoSpin Plasmid EasyPure Columns(dark blue rings)
・Collection Tubes(2 ml)

* 説明書に従って使用前にエタノールを添加すること

キット以外に必要な試薬、器具(主なもの)

試薬
・96~100%エタノール

器具
・1.5 mlマイクロチューブ
・ピペットチップ(滅菌済)
・ピペット
・微量高速遠心機

保存

室温
(Liquid RNase Aを添加したBuffer A1は4℃で保存する。6ヵ月間安定)

操作手順

操作手順

用途

  • 高コピープラスミドの小スケール迅速ミニプレップ
  • シーケンス、クローニング、形質転換、制限酵素解析など
NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。

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