微生物からの高純度なゲノムDNA精製

NucleoSpin® Microbial DNA

  • グラム陰性菌、グラム陽性菌、酵母、糸状菌など、広範囲な微生物からゲノムDNAを抽出、精製
  • NucleoSpin Bead Tubesの使用により効率的に菌体を破砕
  • 迅速、簡単プロトコールで収率良く高純度ゲノムDNAを取得
  • 溶液状のProteinase Kが添付されており、菌体溶解酵素の準備は不要
  • DNA精製に必要な破砕用チューブやProteinase K溶液を含むall-in-oneのキット
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
MNA 740235.10 U0235A NucleoSpin® Microbial DNA
  • 労働安全衛生法
  • 安全データシート(SDS)添付
10回 ¥7,500
説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740235.50 U0235B NucleoSpin® Microbial DNA
  • ゲノムDNA調製
  • 労働安全衛生法
  • 安全データシート(SDS)添付
50回 ¥26,000
¥18,200
2017/08/01~
2017/09/29

説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740786.50 U0786A NucleoSpin® Bead Tubes Type A
50回 ¥17,500
説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740812.50 U0812A NucleoSpin® Bead Tubes Type B
50回 ¥13,000
説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740813.50 U0813A NucleoSpin® Bead Tubes Type C
50回 ¥13,000
説明書・データシート・ベクター情報
MNA 740469 U0469A MN Bead Tube Holder
1個 ¥5,500
説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

NucleoSpin Microbial DNAは、グラム陰性菌、グラム陽性菌、酵母、糸状菌などの微生物から高純度にゲノムDNAを抽出、精製するキットである。本製品の操作は、まず、製品に含まれるNucleoSpin Bead Tubes Type B中のガラスビーズを用いてProteinase Kの存在下で試料を破砕する。この際には一般的な細胞破砕装置を使用することができる。Proteinase Kが含まれているため、新たに菌体溶解酵素を準備する必要はなく、1回の処理で様々な微生物サンプルを破砕することができる。菌体破砕後は、カオトロピック塩の存在下でDNAをカラムに吸着させ、2回の洗浄後、ゲノムDNAを溶出する。迅速、シンプルな操作で、収率良くゲノムDNAを得ることができる。
NucleoSpin Bead Tubesは、サンプルの種類に適したものを使用する。グラム陰性菌、グラム陽性菌にはキットに含まれるNucleoSpin Bead Tubes Type B(別売:製品コード 740812.50)がそのまま使用できる。酵母、糸状菌にはNucleoSpin Bead Tubes Type C(製品コード 740813.50)、土壌、堆積物サンプルにはNucleoSpin Bead Tubes Type A(製品コード 740786.50)が別途必要である。

(注)本製品の使用には撹拌式細胞破砕装置が必要です。

原理 シリカメンブレン法
形状 ミニスピンカラム
サンプル量 <40 mg 湿菌体
精製サイズ 200 bp~約50 kb
回収量 5~25 μg(30 mg 湿菌体)
サンプルの種類、破砕方法に依存
A260/280 1.6~2.0
溶出液量 100~200 μl
精製時間 35分
結合容量 60 μg

内容

NucleoSpin Microbial DNA(製品コード 740235.10/.50)
Lysis Buffer MG
Wash Buffer BW
Wash Buffer B5 (Concentrate)
Elution Buffer BE*1
Liquid Proteinase K
NucleoSpin Bead Tubes Type B
NucleoSpin Microbial DNA Columns
Collection Tubes (2 ml)
*1 組成:5 mM Tris-HCl, pH8.5

NucleoSpin Bead Tubes Type A (製品コード 740786.50)*2
0.6~0.8 mm ceramic beads/2 ml Tube
推奨サンプル:土壌、堆積物
*2 NucleoSpin Soil(製品コード 740780.10/.50/.250)に含まれるものと同じ

NucleoSpin Bead Tubes Type B(製品コード 740812.50)*3
40~400 μm glass beads/2 ml Tube
推奨サンプル:グラム陽性菌、グラム陰性菌
*3 NucleoSpin Microbial DNA(製品コード 740235.10/.50)に含まれるものと同じ

NucleoSpin Bead Tubes Type C(製品コード 740813.50)
1~3 mm corundum/2 ml Tube
推奨サンプル:酵母、糸状菌

保存

室温

操作手順

全DNA抽出操作手順

用途

・微生物培養サンプルからの全DNA精製
・精製DNAはPCR、qPCR、ササンブロッティング、酵素反応などに利用可能

本製品以外に必要な試薬、機器(主なもの)

試薬
  96~100%エタノール

器具
・1.5 mlマイクロ遠心チューブ
・ピペットチップ(滅菌済)
・ピペット
・微量高速遠心機
・推奨細胞破砕装置:
  Vortex-Genie 2 (サイエンティフィックインダストリーズ社)+MN Bead Tube Holder(製品コード 740469)
  撹拌式細胞破砕装置(Retsch社NM200など)

MN Bead Tube Holder
MN Bead Tube Holder(製品コード 740469)
この製品の使用方法はこちらをご覧ください。

使用可能な細胞破砕装置(例)

・Schwingmühle MM200, MM300, MM400 (Veder Scientific社)
・FastPrep System (MP-Biomedicals社)
・Precellys (Bertin Technologies社)
・MagNa Lyser (Roche社)
・TissueLyser II and Tissue Lyser LT (QIAGEN社)
・Bullet Blender (Next Advance社)
・Mini-Beadbeater (Biospec Products社)
・Speed Mill (Analytik Jena社)
・Vortex Adapter for Vortex-Genie 2 X (MoBio社)

様々な微生物からの抽出例

微生物サンプルからのDNA抽出

図1.微生物サンプルからのDNA抽出
NucleoSpin Microbial DNA KitとNucleoSpin Bead Tubes Type B(キットに含まれる)、またはNucleoSpin Bead Tubes Type C(別売)を用いて様々な微生物サンプルからゲノムDNAを抽出した。
抽出DNA各100 ngをアガロースゲル電気泳動で調べた結果、全てのサンプルでRNAの混入やDNAの分解のない高分子のゲノムDNAが確認された。

1.Escherichia coli, NucleoSpin Bead Tubes Type B
2.Vibrio fischerii, NucleoSpin Bead Tubes Type B
3.Bacillus subtilis, NucleoSpin Bead Tubes Type B
4.Corynebacterium glutamicum, NucleoSpin Bead Tubes Type B
5.Saccharomyces cerevisiae, NucleoSpin Bead Tubes Type C

NucleoSpin Microbial DNAで使用実績のある微生物
Microorganisms Tested by
Acinetobacter Customer
Aspergillus spec. MN
Bacillus subtilis Customer
Clostridium ljungdahlii Customer
Corynebacterium glutamicum MN
Escherichia coli MN
Eurotium spec. Customer
Klebsiella pneumoniae Customer
Microbacterium spec. Customer
Pichia pastoris Customer
Pseudomonas aeruginosa Customer
Rhizopus spec. MN
Saccharomyces cerevisiae MN
Staphylococcus pneumoniae Customer
Streptococcus pneumonieae Customer
Trametec spec. Customer
Vibrio fischerii MN

MN:マッハライ・ナーゲル社でテストした菌株種
Customer:ユーザー様よりご報告のあった菌株種

NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。

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