O-157 (ベロ毒素1型、2型遺伝子) PCR Typing Set Plus

O157：H7 をはじめとする腸管出血性大腸菌（EHEC）は、血便と激しい腹痛を伴う出血性大腸炎、さらには溶血性尿毒症症候群を引き起こす病原性大腸菌の一群である。これらの重篤な症状の原因は、EHECが産生する細胞毒素、ベロ毒素によるものである。EHECの検出において、この毒素の産生能力の有無を的確に、かつ迅速にチェックする検査方法の重要性が指摘されている。
本キットは、O-157 に代表される腸管出血性大腸菌による食中毒の原因遺伝子であるベロ毒素1型、2型遺伝子をPCR法で検出することにより、腸管出血性大腸菌のタイピングを簡便かつ迅速に行うための試薬セットである。
本キットでは、PCR酵素にHot Start PCR用酵素であるTaKaRa Ex Taq HSを使用しているので、反応液調製時などのミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができ、より高感度の検出が可能である。
また、従来品O-157 (ベロ毒素1型、2型遺伝子) PCR Typing Set（製品コード RR105A）とはVT2用Primerが異なっており、検出できるべロ毒素2型の変異型遺伝子の種類が増え、VT2vp2の検出も可能となった。

（50 μl反応系、100回用）

1.	EVT-1 primer* (19 pmol/μl；VT1用)	50 μl
2.	EVT-2 primer* (19 pmol/μl；VT1用)	50 μl
3.	EVS-1 primer* (19 pmol/μl；VT2用)	50 μl
4.	EVC-2 primer* (19 pmol/μl；VT2用)	50 μl
5.	TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl)	50 μl
6.	10×Ex Taq Buffer（Mg2＋ plus）	1.0 ml
7.	dNTP Mixture (各2.5 mM)	800 μl
8.	Control Template EC2 (0.1 ng/μl；VT1用)	10 μl
9.	Control Template EC3 (0.1 ng/μl；VT2用)	10 μl

*（株）島津製作所で製造されたものです。

－20℃

[Control Template EC2 ＆ EC3について]

それぞれのプライマー対を用いて腸管出血性大腸菌ベロ毒素遺伝子検出PCRを行う際に、PCRが正常に行われているかを確認するためのポジティブコントロールテンプレート。
Control Template EC2を鋳型にEVT-1 ＆ EVT-2 primer対でPCRを行うと、686 bpの増幅産物が得られる。
また、Control Template EC3を鋳型にEVS-1 ＆ EVC-2 primer対でPCRを行うと、705 bpの増幅産物が得られる。
ベロ毒素遺伝子由来の増幅産物とサイズが異なるので、万一、本コントロールにサンプルがコンタミしても区別することができる。

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