ミトコンドリアDNAを指標に多能性細胞からの分化状態をモニタリング
製品説明
Human Mitochondrial DNA (mtDNA) Monitoring Primer Setは、リアルタイムPCRを利用してヒトのミトコンドリアDNA（mtDNA）コピー数を核DNA（nDNA）を基準として相対的に測定するためのプライマーセットである。本製品にはmtDNAとnDNAを検出するためのプライマーペアがそれぞれ2種類、合計4種類含まれている。各プライマーはPseudogenes（偽遺伝子）を増幅しないように設計されている。また、マウス由来のDNAは増幅しないように設計されているので、iPS細胞のようにマウス由来のフィーダー細胞を用いる場合においても問題なく使用できる。
本製品では、1サンプルに対して4種類のプライマーペアを使用してリアルタイムPCRを行い、得られたmtDNAとnDNAのCt値の差より、mtDNAのコピー数を相対定量にて算出する。本製品を使用することにより、iPS細胞等の多能性細胞から肝細胞などへの分化・誘導過程で変動するmtDNAコピー数を簡単にモニタリングできる。
本製品に含まれる各プライマーペアは、MightyAmp for Real Time (TB Green Plus)（製品コード R075A/B）およびTB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）で良好に反応することを確認している。
解析には、Microsoft Office Excelで作成されたmtDNAコピー数算出用のファイルが利用できます。以下からダウンロードしてご利用ください。
mtDNA_Copy_Number_Calculation（ZIP 9.0 K）
本製品では、1サンプルに対して4種類のプライマーペアを使用してリアルタイムPCRを行い、得られたmtDNAとnDNAのCt値の差より、mtDNAのコピー数を相対定量にて算出する。本製品を使用することにより、iPS細胞等の多能性細胞から肝細胞などへの分化・誘導過程で変動するmtDNAコピー数を簡単にモニタリングできる。
本製品に含まれる各プライマーペアは、MightyAmp for Real Time (TB Green Plus)（製品コード R075A/B）およびTB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）で良好に反応することを確認している。
解析には、Microsoft Office Excelで作成されたmtDNAコピー数算出用のファイルが利用できます。以下からダウンロードしてご利用ください。
mtDNA_Copy_Number_Calculation（ZIP 9.0 K）
内容
（各プライマー 50反応分）
＊1 ミトコンドリアDNA(mtDNA)用プライマー
＊2 核DNA(nDNA)用プライマー
| 1． | ND1 Primer Mix (10 μM each)＊1 | 50 μl |
| 2． | SLCO2B1 Primer Mix (10 μM each)＊2 | 50 μl |
| 3． | ND5 Primer Mix (10 μM each)＊1 | 50 μl |
| 4． | SERPINA1 Primer Mix (10 μM each)＊2 | 50 μl |
＊2 核DNA(nDNA)用プライマー
保存
－20℃
| ※ | 適切に保存し、受取り後1年を目途に使用する。 |
| ※ | 短期間（～1ヵ月）に繰り返し使用する場合には4℃で保存する。ただし、本製品は防腐剤を含んでいないので、コンタミネーションには十分に注意する。 |
本製品以外に必要な試薬、機器（主なもの）
【試薬】
- NucleoSpin Tissue（製品コード 740952.10/.50/.250）
- MightyAmp for Real Time (TB Green Plus)（製品コード R075A/B）または
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus)（製品コード RR820S/A/B）
- リアルタイムPCR装置＊1
Thermal Cycler Dice Real Time System III（製品コード TP950/TP970/TP980）
Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900/TP960：終売）
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite（製品コード TP700/TP760：終売）
＊1 Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System（Thermo Fisher Scientific社）を使用の場合、Baselineがフラットになるように、必要に応じてAuto設定を解除し、ThresholdをManualで設定する必要がある。 - 分光光度計
- 各種マイクロピペット
- マイクロピペット用チップ（疎水性フィルター付）
- 0.2 ml 8-strip tube, individual Flat Caps（製品コード NJ600）
- 0.1 ml 8-strip tube, individual Flat Caps（製品コード NJ902) チューブ1本ごとにフラットキャップが付いているキャップ付き8連チューブです。
NJ600はThermal Cycler Dice Real Time System IIおよびLite（終売）専用、
NJ902はThermal Cycler Dice Real Time System III専用として販売しています。
チューブ間のコンタミネーションの危険性が軽減できるので特にお勧めします。
- 注意事項
- 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
- タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
- タカラバイオ製品に関連するライセンス・パテントについては、ライセンスマークをクリックして内容をご確認ください。
また、他メーカーの製品に関するライセンス・パテントについては、各メーカーのウェブサイトまたはメーカー発行のカタログ等でご確認ください。 - ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
