細胞増殖能力測定 ―マウスT細胞系CTLL-2におけるヒトインターロイキン2(IL-2)の活性の測定―
■試薬
・培地；PRMI1640（10％非働化牛胎児血清(FCS)、2 mM L-グルタミン、1 mM ピルビン酸ナトリウム、1×非必須アミノ酸、50 mM 2-メルカプトエタノール 含有）
任意でペニシリン／ストレプトマイシンまたはゲンタマイシンを加える。
・ヒトIL-2(10,000 U/ml, 5 μg/ml) 無菌状態のもの
・Premix WST-1
■方法
1. マイクロタイタープレートに、種々の濃度のIL-2（最終濃度0.005～25 ng/ml）を含む培地を100 μlずつ入れ、CTLL-2細胞を4×103 cells/wellの濃度でまく。
2. 37℃、5％CO2で48時間、細胞を培養する。
3. Premix WST-1を10 μl/well加えて、37℃、5％CO2で4時間、インキュベーションする。
4. 吸光度を測定する。
■結果
図1：ヒトIL-2存在下でのCTLL-2細胞の増殖能力測定
・培地；PRMI1640（10％非働化牛胎児血清(FCS)、2 mM L-グルタミン、1 mM ピルビン酸ナトリウム、1×非必須アミノ酸、50 mM 2-メルカプトエタノール 含有）
任意でペニシリン／ストレプトマイシンまたはゲンタマイシンを加える。
・ヒトIL-2(10,000 U/ml, 5 μg/ml) 無菌状態のもの
・Premix WST-1
■方法
1. マイクロタイタープレートに、種々の濃度のIL-2（最終濃度0.005～25 ng/ml）を含む培地を100 μlずつ入れ、CTLL-2細胞を4×103 cells/wellの濃度でまく。
2. 37℃、5％CO2で48時間、細胞を培養する。
3. Premix WST-1を10 μl/well加えて、37℃、5％CO2で4時間、インキュベーションする。
4. 吸光度を測定する。
■結果
図1：ヒトIL-2存在下でのCTLL-2細胞の増殖能力測定
