6種類の切片からのβ-globinの増幅
TaKaRa DEXPATと高感度PCR増幅用TaKaRa Ex Taqとの組合せで、より確実なPCR増幅が可能である。以下にTaKaRa Ex Taqを用いた例を示す。
反応液組成
| genome DNA(DEXPAT抽出液) | 5 μl |
| 10×Ex Taq Buffer | 5 μl |
| dNTP Mixture | 5 μl (250 μM each) |
| Primer #1(20 pmol/μl) | 0.5 μl (10 pmol) |
| Primer #2(20 pmol/μl) | 0.5 μl (10 pmol) |
| TaKaRa Ex Taq | 0.25 μl (1.25 U/50 μl) |
| 滅菌精製水 | up to 50 μl |
6種類のパラフィン切片(それぞれ10 μm、2枚)から、DEXPATで抽出したDNAを用いてPCRを行った。なお、本実験で抽出されたDNA溶液は4℃で1ヵ月保存後も同様な増幅パターンを示した。
PCR条件
94℃、30 sec
54℃、60 sec
72℃、60 sec
35 cycles
72℃、5 min
3％ Agarose
Lane M：pHY Marker (100 ng)
Lane 1～6：ホルマリン固定パラフィン包埋切片からDEXPATを用いて抽出したDNAのPCR増幅産物
