Pyrobest DNA Polymerase、
TaKaRa Taq、C社Cloned
PfuおよびC社改良Cloned
Pfuを用いて、0.5、2、6、8、10 kbpのλDNAの増幅を行い、増幅効率について比較検討しました。その結果、
Pyrobest DNA Polymeraseは、C社のいずれのポリメラーゼよりも高い増幅効率をもち、
TaKaRa Taqと同等であることがわかりました。
| PCR反応条件 |
| 94℃、30 sec |
30 cycles |
| 68℃、5 min or 15 min |
| レーン |
酵素量 |
増幅サイズ |
レーン |
酵素量 |
増幅サイズ |
|
PyrobestDNA Polymerase |
C社Cloned Pfu |
| 1： |
1.25 U |
0.5 kbp |
11： |
2.5 U |
0.5 kbp |
| 2： |
2 kbp |
12： |
2 kbp |
| 3： |
6 kbp |
13： |
6 kbp |
| 4： |
8 kbp |
14： |
8 kbp |
| 5： |
10 kbp |
15： |
10 kbp |
|
TaKaRa Taq |
C社改良Cloned Pfu |
| 6： |
1.25 U |
0.5 kbp |
16： |
2.5 U |
0.5 kbp |
| 7： |
2 kbp |
17： |
2 kbp |
| 8： |
6 kbp |
18： |
6 kbp |
| 9： |
8 kbp |
19： |
8 kbp |
| 10： |
10 kbp |
20： |
10 kbp |
|
M： |
λ-Hind III Marker |
Thermal Cycler：TaKaRa PCR Thermal Cycler MP
ゲル：1% Agarose L03「TAKARA」
アプライ量：8μl/50μl
