| 鋳型DNA |
: |
大腸菌ゲノムDNA (1~10 kbp増幅の場合:1 ng/50 μl PCR) (18 kbp, 20 kbp増幅の場合:10 ng/50 μl PCR) |
| 増幅サイズ |
: |
1 kbp, 2 kbp, 4 kbp, 6 kbp, 8 kbp, 10 kbp, 18 kbp, 20 kbp |
| 反応条件 |
: |
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| [1 kbp] |
98℃ |
5秒 |
30サイクル |
| 66℃ |
10秒 |
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| [2 kbp] |
98℃ | 5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
20秒 |
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| [4 kbp] |
98℃ |
5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
30秒 |
|
| [6 kbp] |
98℃ |
5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
50秒 |
|
| [8 kbp] |
98℃ |
5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
75秒 |
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| [10 kbp] |
98℃ | 5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
90秒 |
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| [18 kbp, 20 kbp] |
98℃ |
5秒 |
30サイクル |
| 68℃ |
180秒 |
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| TaKaRa PCR Thermal Cycler PERSONAL使用(FASTモード) |
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| レーン |
増幅サイズ |
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| 1: |
λ-Hind III |
7: |
8 kbp |
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| 2: |
pHY マーカー |
8: |
10 kbp |
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| 3: |
1 kbp |
9: |
18 kbp |
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| 4: |
2 kbp |
10: |
20 kbp |
|
| 5: |
4 kbp |
11: |
pHY マーカー |
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| 6: |
6 kbp |
12: |
λ-Hind III |
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| 各5 μlずつ泳動 |
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| 種々の鎖長の高速PCR |