HumanゲノムDNAを鋳型としてp53 regionの2.9 kbの増幅反応を行った。
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Template
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HeLa CellゲノムDNA |
:100 ng/50 μl |
酵素量 |
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PyrobestDNA Polymerase |
:1.25 U/50 μl |
S社DNA Polymerase |
:1.25 U/50 μl |
PCR反応条件: |
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94℃ 30 sec 58℃ 1 min 72℃ 1 min 30 sec |
┐ │ ┘ |
30 cycle |
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サーマルサイクラー |
:TaKaRa PCR Thermal Cycler MP |
ゲル |
:1% Agarose L03「TAKARA」(製品コード 5003) |
アプライ量 |
:5 μl/50 μl反応液 |
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レーン |
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1: |
PyrobestDNA Polymerase/Pyrobest Buffer |
2: |
PyrobestDNA Polymerase/Pyrobest Buffer II |
3: |
S社DNA Polymerase |
M: |
pHY Marker |
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Pyrobest
Buffer IIを用いて反応を行うことにより、今までのbufferでの反応に比べて増幅産物量の増大が認められた。また、S社DNA Polymeraseの反応では非特異的な増幅が認められているが、
Pyrobest DNA Polymeraseでは認められなかった。