大腸菌のゲノムDNAを鋳型として8 kbの増幅反応を行った。
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Template |
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JM109ゲノムDNA |
:50 ng/50 μl |
酵素量 |
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PyrobestDNA Polymerase |
:1.25 U/50 μl |
S社DNA Polymerase |
:1.25 U/50 μl, 2.5 U/50 μl |
PCR反応条件: |
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98℃ 10 sec 68℃ 10 min |
┐ ┘ |
30 cycle |
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サーマルサイクラー
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:TaKaRa PCR Thermal Cycler MP |
ゲル |
:1% Agarose L03「TAKARA」(製品コード 5003) |
アプライ量 |
:5 μl/50 μl反応液 |
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レーン |
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1: |
PyrobestDNA Polymerase/Pyrobest Buffer |
2: |
PyrobestDNA Polymerase/Pyrobest Buffer II |
3: |
S社DNA Polymerase(1.25 U/50 μl) |
4: |
S社DNA Polymerase(2.5 U/50 μl) |
M: |
λ-Hind III digest |
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Pyrobest
Buffer IIを用いて反応を行うことにより、今までのbufferでの反応に比べて増幅産物量の増大が認められた。また、S社DNA Polymeraseを同量(1.25 U/50 μl)使用した場合の反応よりも増幅産物量は多く、2倍量(2.5 U/50 μl)の場合と同程度の増幅産物量が認められた。