実験例-1; pBAsiベクターを用いたノックダウン
GFPのターゲット配列（GGAGTTGTCCCAATTCTTG)に対するヘアピン型RNA発現のためのオリゴDNA（下記）を合成し、それをpBAsi-hU6のBamHI-HindI部位に挿入し、siRNA発現用プラスミドベクターを構築した。ネガティブコントロールとして、ターゲット配列に対するスクランブル配列を用意した。
293T細胞に、標的となるGFP発現ベクターとsiRNA発現ベクターをTransIT-293を用いて、コトランスフェクションし、24時間後に蛍光顕微鏡でGFPタンパクの発現状態を観察した（下写真）。その結果、siRNA発現ベクターによるGFPタンパクの発現抑制が確認できた。
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293T細胞に、標的となるGFP発現ベクターとsiRNA発現ベクターをTransIT-293を用いて、コトランスフェクションし、24時間後に蛍光顕微鏡でGFPタンパクの発現状態を観察した（下写真）。その結果、siRNA発現ベクターによるGFPタンパクの発現抑制が確認できた。
- (1) 細胞のみ
- (2) GFP発現ベクター0.2 μg＋pBAsi-hU6-NC 0.3 μg（ネガティブコントロール）
- (3) GFP発現ベクター0.2 μg＋pBAsi-hU6-GFP 0.3 μg
