実験例-2 siRNA発現アデノウイルスによるノックダウン
実験例-1でRNAi効果を確認したpBAsi-hU6-GFPから、「プロモーター＋ヘアピン型RNA配列」をEcoR Vで切り出してアデノウイルス作製用コスミドpAxcwitのSmi I（Swa I）部位に挿入した。アデノウイルスの作製はAdenovirus Expression Vector Kit（Dual Version）のプロトコールに従って行い、6.0×109 pfu/mlのウイルス液を得た。得られたsiRNA発現アデノウイルスをGFP発現細胞に感染し、蛍光強度の変化を観察した（下図）。siRNA発現アデノウイルスによるRNAi効果が確認できた。
あらかじめHepG2（ヒト肝臓由来）にGFPを導入した細胞を構築しておき、この細胞に組換えアデノウイルスをMOI=60で感染し、5日後にフローサイトメーターで蛍光強度を観察した。
黒：HepG2
緑：GFP発現HepG2
赤：siGFP発現アデノウイルスを感染させたGFP発現HepG2
黄緑：siスクランブル（NC）発現アデノウイルスを感染させたGFP発現HepG2
