cDNA Library Construction Kit
             
           
         
      
      
        
          インサート分布の確認
                    
            
            
            プロトコールに従って、Chicken由来のpolyA
+ RNA 5 μgを鋳型として、cDNAライブラリーを作製した。得られたコロニーからランダムに選択したクローン16個について、キット添付のベクタープライマー (T7 promoter primerおよびT3 promoter primer (for pAP3neo)) を用いたPCRによりインサートDNAの増幅を行い、1% アガロースゲル電気泳動により確認した。
●コロニーPCR条件 (10 μl反応系)
| TaKaKaRa Ex Taq HS | 
 | 0.1 μl (0.5 U) | 
| 各Primer | 各2.5 pmol | 
| 95℃、5分 ↓
 94℃、30秒
 55℃、30秒 30サイクル
 72℃、 3分
 ↓
 72℃、10分
 | 
●結果
|  | Lane M1:λ-EcoT14 I digest
 M2:pHY Marker
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                    cDNA Library Construction Kit