cDNA Library Construction Kit
インサート分布の確認
プロトコールに従って、Chicken由来のpolyA
+ RNA 5 μgを鋳型として、cDNAライブラリーを作製した。得られたコロニーからランダムに選択したクローン16個について、キット添付のベクタープライマー (T7 promoter primerおよびT3 promoter primer (for pAP3neo)) を用いたPCRによりインサートDNAの増幅を行い、1% アガロースゲル電気泳動により確認した。
●コロニーPCR条件 (10 μl反応系)
TaKaKaRa Ex Taq HS |
| 0.1 μl (0.5 U) |
各Primer | 各2.5 pmol |
95℃、5分
↓
94℃、30秒
55℃、30秒 30サイクル
72℃、 3分
↓
72℃、10分
|
●結果
| Lane M1:λ-EcoT14 I digest M2:pHY Marker |
cDNA Library Construction Kit