pCold™ TF DNA

可溶化しにくいタンパク質発現の例として、酵素タンパク質B（推定分子量63 ｋDa）を用いて検討した。 酵素タンパク質Bは、可溶化タグとして知られるTrxタグ（約12 kDa）、Nusタグ（約55 kDa）、GSTタグ（約26 kDa）をそれぞれ融合発現するT7発現ベクターを用いた場合には、ほとんど可溶性発現が認められなかった。
また、可溶化発現能に優れているpCold I DNA（単独発現、シャペロン共発現）を用いた場合でも、ほとんど可溶性発現が認められなかった。
一方、トリガーファクターを融合させたpCold TF DNAを用いた場合は、目的タンパク質の大部分が可溶性画分に得られ、その可溶化度は他のタグと比較して著しく高いことがわかった（図1）。

図1　酵素タンパク質Bの発現

1：細胞抽出液画分 2：可溶性画分 3：不溶性画分