HL60細胞由来のtotal RNAを鋳型として本キットのプロトコールにより、Oligo dT Primerで逆転写を行った逆転写反応液を用い、GAPDHをターゲットとして、検出感度測定を実施した。(各20 μlの逆転写反応液から、それぞれ5 μlをPCRに使用)
ターゲット:GAPDH 428 bp
PCR条件:
94℃
94℃ 55℃ 72℃ |
↓ |
1 min.
30 sec. 30 sec. 1 min. |
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40 cycles |
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RNA template(total RNA) |
1: 2: 3: 4: 5: M: |
0.1 pg 1 pg 10 pg 100 pg 1 ng 100 bp DNA ladder |
total RNA量1 pgから検出が可能であった(PCR段階では0.25 pg total RNAに相当)。