PrimeScript™ RTase ＆ TaKaRa Ex Taq® HSで至適化した2ステップRT-PCRキット
製品説明
本製品は、優れた伸長性と非常に高い増幅効率を提供する2ステップRT-PCR用のキットである。逆転写反応にはM-MLV由来のRTaseをベースにしてタカラバイオが独自に開発した逆転写酵素PrimeScript RTaseを採用し、PCRには増幅効率に優れたホットスタートPCR用酵素TaKaRa Ex Taq HSを用い、2ステップRT-PCR用に至適化している。さらにタカラバイオのRT-PCR テクノロジーを組み合わせることにより、次のような特長を示す。
- 非常に効率よくRT-PCR増幅産物が得られる。
- 標準的な逆転写反応温度（42℃）で、高次構造を取り得る鋳型RNAにも優れた伸長性を示す。RNAが分解されるリスクのある高温での反応は不要。
- 反応液調製時などサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を抑制する。
内容
（50回分）*1
*1 [ 逆転写反応系20 μl → PCR 反応系50 μl ] の場合の50 回分
*2 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*3 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー
| 1. | PrimeScript RTase (for 2step) | 25 μl |
| 2. | 5×PrimeScript Buffer | 200 μl |
| 3. | RNase Inhibitor （40 U/μl） | 25 μl |
| 4. | dNTP Mixture （10 mM each） | 150 μl |
| 5. | Oligo dT Primer （2.5 μM） | 50 μl |
| 6. | Random 6 mers （20 μM） | 50 μl |
| 7. | TaKaRa Ex Taq HS （5 U/μl） | 25 μl |
| 8. | 10×PCR Buffer II | 250 μl |
| 9. | Control F-1 Primer*2 （20 μM） | 10 μl |
| 10. | Control R-1 Primer*3 （20 μM） | 10 μl |
| 11. | Positive Control RNA （2×105 copies/μl） | 20 μl |
| 12. | RNase Free dH2O | 1 ml |
*1 [ 逆転写反応系20 μl → PCR 反応系50 μl ] の場合の50 回分
*2 Positive Control RNA用上流センスプライマー
*3 Positive Control RNA用下流アンチセンスプライマー
保存
－20℃
特長
| RNAテンプレート | 全般 |
| 増幅サイズ | 12 kbの増幅を確認 |
| 逆転写酵素 | PrimeScript RTase （至適反応温度42℃） |
| DNA Polymerase | TaKaRa Ex Taq HS |
| RNase Inhibitor | 必要（キットに含まれる） |
| 1st strand cDNA合成用プライマー | Random 6 mers、Oligo dT Primer、特異的下流プライマーより選択可 |
キット以外に必要な試薬、機器（主なもの）
- 遺伝子増幅システム
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient（製品コード TP600）
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Touch（製品コード TP350）など - アガロースゲル
Agarose L03（製品コード 5003）
PrimeGel Agarose PCR-Sieve（製品コード 5810A）など - 電気泳動装置
Mupid-2plus（製品コード M-2P）
Mupid-exU（製品コード EXU-1）など - マイクロ遠心機
- マイクロピペットおよびチップ（オートクレーブ処理したもの）
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