Mighty TA-cloning Kit

Mighty TA-cloning Kitは、TAクローニング法^*によりPCR産物を短時間で簡便にクローニングするためのキットであり、ライゲーション反応にDNA Ligation Kit＜Mighty Mix＞を使用しているので、簡便な操作で短時間に高効率なライゲーション反応を行うことができる。また、キットにはpUCベースのpMD20T-Vectorを含む。

* TAクローニング：

Taq DNA ポリメラーゼなどをベースとするPCR酵素を用いて得られた増幅産物のほとんどは、その3’末端にデオキシリボアデノシン（dA）が一塩基付加されている。これらのPCR増幅産物をクローニングする方法として、3’末端にデオキシリボチミジン（dT）を一塩基付加したTベクターを使用し、PCR増幅産物のdA一塩基突出部分と相補的となることを利用してクローニングを行う。

[注意]
PrimeSTARシリーズで増幅したPCR産物はほとんどが平滑末端となるため、そのままでは本キットを用いてTAクローニングすることはできません。PrimeSTARシリーズの増幅産物をTAクローニングに用いる場合には、3’末端にdAを付加する試薬を含むMighty TA-cloning Reagent Set for PrimeSTAR（製品コード 6019）をご利用ください。

（20回分）

1. pMD20-T vector（50 ng/μl）	20 μl
2. Ligation Mighty Mix *1	50 μl×2
3. Positive Control Insert *2	10 μl

*1	Ligation Mighty MixはDNA Ligation Kit＜Mighty Mix＞（製品コード 6023）と同じものです。
*2	3’-末端にdAオーバーハングを有する約200 bpのDNAフラグメント（E. coli ゲノムDNAを鋳型として、TaKaRa Ex Taqで増幅したもの）（10 ng/μl）

－20℃

ZIP形式で圧縮しておりますが、StuffIt Expander等でも解凍できます。

図1. pMD20-Tのベクターマップ

図2. pMD20-Tクローニングサイト

 

下記よりPDFでご覧いただけます。

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