T4 DNA LigaseによるDNAフラグメントのライゲーション反応
反応液組成*
* 10×Bufferとして製品に添付
| 66 mM | Tris-HCl（pH7.6） |
| 6.6 mM | MgCl2 |
| 10 mM | DTT |
| 0.1 mM | ATP |
突出末端のライゲーション反応
6 μg/20 μlのλDNA-Hind III分解物をT4 DNA Ligase 1Uと16℃で10～60分反応させた。
図1 λ DNA-Hind III分解物のアガロースゲル電気泳動
0.7％Agarose（1μg/mlエチジウムブロマイド含有）
| Lane 1： | λDNA-Hind III分解物 |
| 2： | 16℃ 10分保温 |
| 3： | 16℃ 20分保温 |
| 4： | 16℃ 30分保温 |
| 5： | 16℃ 60分保温 |
平滑末端のライゲーション反応
0.5 μg/25 μlのCol E1-Hae III分解物をT4 DNA Ligase 100 Uと16℃で10～60分反応させた。
図2 Col E1-Hae III分解物のアガロースゲル電気泳動 0.7％Agarose（1μg/mlエチジウムブロマイド含有）
| Lane 1： | Col E1-Hae III分解物 |
| 2： | 16℃ 10分保温 |
| 3： | 16℃ 20分保温 |
| 4： | 16℃ 30分保温 |
| 5： | 16℃ 60分保温 |
