Terminal Deoxynucleotidyl Transferase

dGTPを用いたホモポリマーのTailing反応

  1. 次の反応液を調製する。

    DNA

    4-5 pmol

    (3'末端)

    5×TdT Buffer

    10μl

     

    0.1% BSA

    5μl

    dGTP

    0.05-0.5 mM

    (final)

    TdT

    10-15 U

    滅菌蒸留水


    Total

    50μl



  2. 37℃、30 min.インキュベートする。



  3. 5μlの5 M NaCl、1μlの0.5 M EDTA(pH8.0)を加える。



  4. フェノール/クロロホルム/イソアミルアルコール(25:24:1)50μlで抽出し、エタノール沈殿させる。

  Terminal Deoxynucleotidyl Transferase