DNA Polymerase I (E. coli )

1．以下の反応液を調製する。

鋳型DNA	0.05～1 μg
10×E coli DNA Polymerase I Buffer	4 μl
dNTP Mixture（0.1 mM dATP, dGTP, dTTP）	4 μl
111 TBq/mmol[α-32P]dCTP （3,000 Ci/mmol）	10 μl （3.7 MBq, 100 μCi）
DNA Polymerase（5 units/μl）	0.8 μl
DNase I(0.0004 units/μl）	1 μl
dH2O	up to 40 μl

2．15℃で2時間反応させる。

3. 70℃で5～10分間熱処理する。

そのまま適量をハイブリダイゼーションプローブ液として用いる（必要ならば、ゲルろ過あるいはエタノール沈殿で未反応の標識dCTPを除去する）。