MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.2
ダイレクトPCR例7:口腔細胞懸濁液
MightyAmp DNA Polymerase Ver.2(製品コード R071A/B)
Buffer A(TE Buffer)
 | Buffer B(TE Buffer+Proteinase K)
 |
| (弊社比較データ) |
| A: | A社動物組織用PCR酵素 |
| B: | MightyAmp Ver.2 |
| C: | B社阻害物質耐性PCR酵素 |
| レーン | サンプル量 |
| 1. | 0.5 μl |
| 2. | 1 μl |
| 3. | 2 μl |
| M. | pHY Marker |
- 口腔細胞懸濁液の調製法
(1)滅菌済み綿棒で頬の内側を10回こする。
(2)Buffer(AまたはB)の入ったチューブに綿棒を入れて、5回攪拌し、綿棒をチューブの壁にあててしぼる。
Buffer A:TE Buffer 300 μl
Buffer B:TE Buffer 300 μl+20 mg/ml Protinase K 1.5 μl
(3)BufferBを使用したサンプルのみ、Proteinase K失活のため、98℃、2分の処理を行う。
- 調製した口腔細胞懸濁液(0.5 μl、1 μlまたは2 μl)を直接反応系(20 μl)に添加
- ターゲット:p53遺伝子 515 bp
- PCR条件
| 98℃ 2分 |
| ↓ | |
| 98℃ 10秒 | | 35サイクル |
| 60℃ 15秒 |
| 68℃ 30秒 |
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(製品コード TP600)使用
- 電気泳動量 3 μl
- ゲル 1% Agarose L03「TAKARA」
MightyAmp™ DNA Polymerase Ver.2