マウスES細胞におけるEF1αプロモーター及びCAGプロモーター制御下のβ-ガラクトシダーゼ活性の比較
Adenovirus Dual Expression Kit (EF1α)（製品コード 6174）
β-ガラクトシダーゼ遺伝子を発現する組換えアデノウイルスを、Adenovirus Dual Expression Kit (EF1α)（製品コード 6174、EF1αプロモーター使用）及びAdenovirus Dual Expression Kit（製品コード 6170、CAGプロモーター使用）を用いて作製し、マウスES細胞にいずれもMOI (Multiplicity of infection)＝500で感染させた。48時間培養後にβ-Galactosidase Staining Kit（製品コード MIR2600）を用いてX-gal染色を行った。その結果、EF1αプロモーターはマウスES細胞において高い発現量を示し、マウスES細胞に対するEF1αプロモーターの有効性が確認できた（図1パネルA、B）。
また、上記の組換えアデノウイルスを図2に示すMOIにてマウスES細胞に感染させ、β-ガラクトシダーゼ活性をMammalian β-Galactosidase Assay Kit（製品コード 75707）を用いて測定した。その結果、EF1αプロモーターが1.5～3倍高い活性値を示し、X-gal染色実験の結果との相関性が確認できた（図2）。
図1. マウスES細胞へのβ-ガラクトシダーゼ遺伝子の導入（MOI＝500）
パネルA：EF1αプロモーターを用いた場合、マウスES細胞での高い発現が確認できた。
パネルB：CAGプロモーターを用いた場合、マウスES細胞での発現はやや低く、フィーダー細胞での発現もみられた。
パネルC：コントロール
図2. マウスES細胞における、CAGプロモーター及びEF1αプロモーター制御下のβ-ガラクトシダーゼ活性の比較
また、上記の組換えアデノウイルスを図2に示すMOIにてマウスES細胞に感染させ、β-ガラクトシダーゼ活性をMammalian β-Galactosidase Assay Kit（製品コード 75707）を用いて測定した。その結果、EF1αプロモーターが1.5～3倍高い活性値を示し、X-gal染色実験の結果との相関性が確認できた（図2）。
| A | B | C |
 | ||
| ×10 | ×10 | ×10 |
パネルA：EF1αプロモーターを用いた場合、マウスES細胞での高い発現が確認できた。
パネルB：CAGプロモーターを用いた場合、マウスES細胞での発現はやや低く、フィーダー細胞での発現もみられた。
パネルC：コントロール
図2. マウスES細胞における、CAGプロモーター及びEF1αプロモーター制御下のβ-ガラクトシダーゼ活性の比較
