RetroNectin Bound Virus（RBV）-Static法（静置感染）
RetroNectin (Recombinant Human Fibronectin Fragment)（製品コード T100A/B）
- 目的遺伝子を持つ組換えレトロウイルス液の原液、または希釈液をRetroNectinコートプレート上に125～250 μl/cm2となるように加える。
- 32～37℃、5% CO2インキュベーターで4～6時間静置し、RetroNectinへのウイルス粒子吸着を促す。
- プレート上が乾燥しないように注意しながら、ウイルス液を除去し、適当量のPBSまたは0.1～2%のアルブミン（BSAやHSA）を含むPBSを添加する（溶液は細胞への遺伝子導入直前まで除かない）。
- 標的細胞懸濁液を調製する。適切な細胞濃度は標的細胞の大きさや増殖率によって異なる。細胞に応じて、0.05～5×105 cells/cm2の範囲で検討する。
- 3で作製したウイルス結合プレートの溶液を除去し、速やかに細胞懸濁液を加える。
注：標的細胞とウイルスベクターの接触を促す目的で、細胞添加後、遠心操作を行っても良い。 - 37℃、5% CO2インキュベーターで培養する。
☆RBV-Static法による実験例
RetroNectinを用いた遺伝子導入法の最適化
