CycleavePCR™ EHEC (O抗原型) Typing Kit

ファイルの新規作成

1. ファイルを新規作成する。
2. 解析タイプとして＋／－判定を選択する。
   （注）＋／－判定（Cycleave PCR Kit）とは異なります。
3. 多波長検出にチェックを入れる。

ウェル情報設定

1. インターナルコントロールの設定は＜none＞であることを確認する。
2. サンプルタイプ（NC、PC、UNKN）を選択する。
3. ターゲット設定のマーク（A、B、C・・・）を選択する。
   CycleavePCR EHEC (O抗原型) Typing Kitを用いて6血清型を同時に測定する場合、CY237を用いた反応を「A」、CY238を「B」、CY239を「C」と設定する。
   使用する製品が1種類のみの場合は、すべてAとする。
4. 必要に応じてターゲット名を設定する。
   
   画面右上の補助ボタンをクリックする。
   補助設定画面でターゲットの名称を設定する。
   


5. 必要に応じてサンプル名を設定する。
   画面右上の表示切替の名称を選択すると、下記のような画面になる。
   

反応条件設定

1．検出フィルターの設定は＜FAM、ROX＞にチェックが入っていることを確認する。
2．温度条件とデータ取得が図の条件となっているか確認する。

初期変性（Hold） 　　　Cycle：1 　　　95℃ 10秒

3 step PCR

Cycle：45 　　　95℃　5秒 → 55℃　10秒 → 72℃　20秒（検出）

注	“Speed”は、Thermal Cycler Dice Real Time System III with PC（製品コード TP970）の場合はNormalに、Thermal Cycler Dice Real Time System II（製品コード TP900）やLite（製品コード TP700）ではFastに設定する。 食品環境検査用ソフトウェア使用の場合、Speedの設定は各装置のデフォルト条件のままなので、設定の変更は不要。

結果の解析
＋／－判定の閾値の設定
1．検出フィルターのFAMボタンをクリックする。
2．データ解析のメニューから測定値分布を選択する。
3．閾値のタブでManualを選択し、40と入力する。
4．適用ボタンをクリックする。
5．ROXについてもFAMと同様に設定する。


＋／－判定結果の確認
1．検出フィルターのFAMまたはROXボタンをクリックする。
2．データ解析のメニューから判定結果を選択する。
3．＋/－の結果を確認し、取扱説明書の判定表に従って判定する。


テキストレポートの出力方法
1．検出フィルターのFAMまたはROXボタンをクリックする。
2．出力したいウェルを表示セレクトから選択する。
3．データ解析のメニューからテキストレポートを選択する。
4．詳細項目で必要な項目を選択する。
5．右クリックメニューから出力方法を選択する。