変異導入効率の比較 ： プラスミドDNA vs Cas9タンパク質 ＆ sgRNA複合体（RNP）
方法
サーモフィッシャー社エレクトロポレーション装置Neonを使用し、プラスミドDNA、もしくはGuide-it Recombinant Cas9 (3 μg/μl)（製品コード 632641）とsgRNAの複合体（RNP）をZsGreen1低発現細胞（iPSCおよび293T）に導入し、点変異導入（ノックイン）実験を行った。 ZsGreen1低発現細胞は、開始コドンに変異を入れてZsGreen1の発現レベルを抑えており、点変異導入実験は開始コドン領域をターゲットとして発現レベルの回復を目的とした。
フローサイトメーターによりZsGreen1発現回復細胞をカウントし、ノックイン効率を解析した。
フローサイトメーターによりZsGreen1発現回復細胞をカウントし、ノックイン効率を解析した。
結果
プラスミドDNAより、Cas9タンパク質 ＆ sgRNA複合体（RNP）を使用した方が高いノックイン効率を示しました。
