PCR阻害物を含むDNA溶液の再精製プロトコール1（フミン酸の混入量が多くない場合）
NucleoSpin Inhibitor Removal（製品コード 740408.10, 740408.50）
| 試薬の調製 | Buffer IRW＊1, Buffer IR1X＊2が添付の英文説明書に従って調製されていることを確認する。 | |
| 1. | サンプルの準備 |
 100 μlのDNA溶液をマイクロチューブ（1.5 mlまたは2 ml：各自で用意）に入れる。 溶液が100 μl以下の場合は、Buffer BEを添加して100 μlにする。 |
|---|---|---|
| 2. | Bufferの添加 |
 Buffer IR1X 300 μlを添加し、混合後室温で1分間静置する。 エタノール210 μlを添加し、混合する。 NucleoSpin Inhibitor Removal ColumnをCollection Tubeにセットし、上記溶液をカラムに添加する。 |
| 3. | カラムへの吸着 |
  10,000×g、30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 |
| 4. | メンブレンの洗浄 |
1回目の洗浄
Buffer IRW 500 μlをカラムに添加し、10,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 2回目の洗浄 Buffer IRW 300 μlをカラムに添加し、10,000×gで2分間遠心する。 ろ液を捨てた後、カラムをマイクロチューブ（1.5 ml：各自で用意）にセットする。 |
| 5. | 溶出液の添加 |
 Buffer BE 100 μlを添加し、蓋を閉めて、1分間室温で静置する。 |
| 6. | DNAの溶出 |
11,000×gで1分間遠心し、DNAを溶出させる。
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＊1 Buffer IRWの調製法
製品コード 740408.10の場合は、Wash Buffer IRW 6 mlに96～100％エタノール 24 mlを添加する。
製品コード 740408.50の場合の調製法は英文説明書を参照すること。
製品コード 740408.10の場合は、Wash Buffer IRW 6 mlに96～100％エタノール 24 mlを添加する。
製品コード 740408.50の場合の調製法は英文説明書を参照すること。
＊2 Buffer IR1Xの調製法
Buffer IR1Xの調製法1サンプルあたり、Buffer IR1 240 μlとAdditive IRX 60 μlを混合する。サンプル数に応じて混合量を増やす。Additive IRXは界面活性剤であり、また非常に粘性が高い。ゆっくりとピペッティングを行い、混合の際も激しく泡立てないように注意する。
Buffer IR1Xは室温で6ヵ月安定である。
Buffer IR1Xの調製法1サンプルあたり、Buffer IR1 240 μlとAdditive IRX 60 μlを混合する。サンプル数に応じて混合量を増やす。Additive IRXは界面活性剤であり、また非常に粘性が高い。ゆっくりとピペッティングを行い、混合の際も激しく泡立てないように注意する。
Buffer IR1Xは室温で6ヵ月安定である。
＜注意＞
使用時には、詳細は必ず添付の英文説明書を確認すること。
