試薬の調製 | Buffer NT3*1が添付の英文説明書に従って調製されていることを確認する。 アガロースゲルからのDNA精製を行う場合には、切り出したゲルの重量を測定しておく。 | |
1. | サンプルの準備 |
試料に対して2倍量のBuffer NT1を加える。 Vortexで混合する。 アガロースゲルからのDNA精製の場合には2、3分ごとにvortexで混合しながら、50℃で温めて、 アガロースゲルを完全に融解させる。 |
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2. | カラムへの吸着 |
NucleoSpin Gel and PCR Clean-up XS ColumnをCollection Tube (2 ml)にセットする。 500 μlまでの1の溶液をカラムに添加し、11,000×g、30秒間遠心する。 ろ液を捨てた後、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 1の溶液が残っている場合はさらに残りをカラムに添加し、11,000×g、30秒間遠心したのち、 ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。 |
3. | メンブレンの洗浄 |
Buffer NT3 500 μlをカラムに添加し、11,000×gで30秒間遠心する。 ろ液を捨て、同じCollection Tubeにカラムをセットする。*2 |
4. | メンブレンの洗浄、乾燥 |
Buffer NT3 300 μlをカラムに添加し、11,000×gで1分間遠心する。
ろ液を捨てた後、カラムをマイクロチューブ(1.5 ml:各自で用意)にセットする。 |
5. | DNAの溶出 |
Buffer NE 6~12 μlを添加し、蓋を閉めて、1分間室温で静置する。
11,000×gで1分間遠心し、DNAを溶出させる。 溶出液を再度カラムに添加し、、蓋を閉めて、1分間室温で静置したのち、 11,000×gで1分間遠心し、DNAを溶出させる。 |